Tavoite: Tavoitteenamme oli arvioida 6′,7′-dihydroksibergamottinin (DHB) osuutta greippimehun estävään vaikutukseen suoliston sytokromi P450 (CYP) 3A4:ää kohtaan.
Menetelmät: Greippimehusta valmistettiin vesipitoinen uute sentrifugoimalla, suodattamalla ja pesemällä hiukkaset toistuvasti vedellä. Eri furanokumariinien pitoisuudet tässä greippimehun ”seerumissa” ja kokonaisessa greippimehussa mitattiin HPLC:llä ja niiden identiteetti vahvistettiin nestekromatografia-tandem-massaspektrometrialla. Viidelle terveelle vapaaehtoiselle annettiin yksi tabletti felodipiinia (10 mg) kokonaisen greippimehun, appelsiinimehua sisältävän seerumin tai pelkän appelsiinimehun (kontrolli) kanssa. Felodipiinin farmakokineettiset tulokset arvioitiin ei-kompartmentaalisilla menetelmillä. Seerumin ja puhdistetun DHB:n (samoina pitoisuuksina kuin ne, jotka mitattiin kliinisessä tutkimuksessa käytetystä appelsiinimehua sisältävästä seerumista) vaikutuksia verrattiin in vitro (1) komplementaarista deoksiribonukleiinihappoa sisältävän CYP3A4:n katalyyttisen aktiivisuuden palautuvan ja mekanismiin perustuvan eston ja (2) immunoreaktiivisen CYP3A4-proteiinin ajasta riippuvaisen häviämisen osalta modifioiduissa Caco-2-soluissa.
Tulokset: DHB:n pitoisuus seerumissa oli verrattavissa kokonaisesta greippimehusta mitattuun pitoisuuteen (38 mikromoolia/l vs. 43 mikromoolia/l), ja muiden tunnettujen furanokumariinien pitoisuudet olivat reilusti pienimmän julkaistun pitoisuuden alapuolella, joka vaaditaan katalyyttisen aktiivisuuden estämiseksi 50 prosentilla. Pelkkään appelsiinimehuun verrattuna appelsiinimehua sisältävä seerumi lisäsi merkitsevästi plasman pitoisuus-aikakäyrän alle jäävän felodipiinin mediaanipinta-alan 1,9-kertaiseksi (P =.04) ja lisäsi maksimipitoisuuden 1,7-kertaiseksi (P =.01). In vitro seerumilla ja puhdistetulla DHB:llä oli samanlainen CYP3A4-aktiivisuutta estävä vaikutus sekä palautuvan eston (95 %:n luottamusväli 85 % +/- 5,7 % ja 75 % +/- 4,5 %) että mekanismiin perustuvan eston osalta 15 minuutin esi-inkuboinnin jälkeen (95 %:n luottamusväli 79 % +/- 6,8 % ja 78 % +/- 5,7 %). Caco-2-soluissa seerumin ja puhdistetun DHB:n aiheuttaman CYP3A4-proteiinin häviämisen aikakeskiarvo oli sama (43 %).
Päätelmät: Greippimehun seerumin ja felodipiinin välinen vuorovaikutus johtuu suurelta osin DHB:stä. Tämä osoittaa DHB:n olevan tärkeä tekijä greippimehuvaikutuksessa.