ABSTRACT
ATP-sitovien kasettivalkuaisproteiinien ABC-F-alatyypin jäsenet välittävät resistenssiä laajalle joukolle kliinisesti tärkeitä antibioottiluokkia, jotka kohdentuvat grampositiivisten patogeenien ribosomiin. Näiden proteiinien toimintamekanismi on ollut pitkään kiistanalainen aihe, ja kaksi kilpailevaa hypoteesia on saanut kumpikin huomattavaa kannatusta: antibioottien ulosvirtaus ja ribosomien suojaaminen. Tässä raportoidaan tutkimuksista, joissa on käytetty bakteriologisten ja biokemiallisten tekniikoiden yhdistelmää näiden proteiinien resistenssimekanismin selvittämiseksi, ja esitetään useita todisteita, jotka yhdessä tukevat selvästi ribosomaalista suojaa koskevaa hypoteesia. Erityisesti osoitamme, että puhdistettujen ABC-F-proteiinien lisääminen in vitro -translaatiomääritykseen johtaa annosriippuvaiseen translaation pelastumiseen, ja osoitamme, että tällaiset proteiinit pystyvät syrjäyttämään antibiootin ribosomista in vitro. Tietojemme mukaan nämä kokeet ovat ensimmäinen suora todiste siitä, että ABC-F-proteiinit välittävät antibioottiresistenssiä ribosomaalisen suojan kautta.
TÄRKEÄÄ Mikrobilääkeresistenssi on yksi suurimmista uhkista, joka tällä hetkellä uhkaa ihmisten terveyttä. Niiden mekanismien selvittäminen, joiden avulla mikro-organismit vastustavat antibioottien vaikutusta, on keskeistä tämän ilmiön biologian ymmärtämiseksi, ja sillä on potentiaalia antaa tietoa sellaisten uusien lääkkeiden kehittämiseksi, jotka pystyvät estämään tai kiertämään resistenssin. ABC-F-perheen jäsenet, joihin kuuluvat lsa(A), msr(A), optr(A) ja vga(A), tuottavat yhdessä resistenssiä useammille kliinisesti merkittäville antibioottiluokille kuin mikään muu resistenssideterminanttiperhe, vaikka niiden toimintamekanismi on ollut kiistanalainen sen jälkeen, kun ne löydettiin 25 vuotta sitten. Tässä esitämme ensimmäiset suorat todisteet siitä, että ABC-F-perheen proteiinit suojaavat bakteerien ribosomia antibioottivälitteiseltä inhibitiolta.