2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin ja Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Korean tasavalta
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Tiivistelmä :
3D8 yksiketjuinen muuttuva fragmentti (scFv) on rekombinantti vasta-aine. 3D8 scFv koostuu muuttuvista raskaan ketjun domeeneista (VH) ja muuttuvista kevyen ketjun domeeneista (VL), jotka on yhdistetty joustavalla peptidilinkkerillä. 3D8 scFv eristettiin autoimmuunille alttiista MRL-lpr/lpr-hiiristä. Sillä on DNaasi- ja RNaasiaktiivisuus ilman merkittävää sekvenssispesifisyyttä. Se sisäistyy kaveolivälitteisen endosytoosin kautta ja kertyy sytosoliin. Aiemmissa tutkimuksissa WT 3D8 scFv osoitti antiviraalisia vaikutuksia pseudorabies-virusta (PRV) ja herpes simplex -virusta tyyppi 1 (HSV-1) vastaan. Kuten WT 3D8 scFv, 3D8 VL voi hydrolysoida DNA- ja RNA-substraatteja ja se tunkeutuu myös sytoplasmaan. Tässä tutkimuksessa olen verrannut 3D8 VL:n ja WT 3D8 scFv:n DNA:ta ja RNA:ta hydrolysoivaa aktiivisuutta. Mittasin 3D8 VL:n stabiilisuutta eri pH-alueilla ja lämpötiloissa käyttämällä FRET-testiä (fluoresenssiresonanssienergian siirto). Vahvistin myös solun tunkeutumisaktiivisuuden sytoplasmaan solukalvon läpi ja osoitin, että 3D8 VL:llä ei ole sytotoksista vaikutusta isäntäsoluun, kuten WT 3D8 scFv:llä (in vitro). 3D8 VL -proteiinia havaittiin useissa elimissä (maksassa, keuhkoissa ja aivoissa) ja veressä, kun injektoin proteiinia hiirelle vatsakalvon sisäisen injektion kautta. Käyttämällä in vivo -kuvantamista olen vahvistanut, että 3D8 scFv ja VL voivat imeytyä vereen ja kiertää sitten koko kehossa ja lopulta ne pääsevät useisiin elimiin. Tulokset osoittavat, että 3D8 VL:llä on samanlaiset biokemialliset ja biologiset ominaisuudet kuin WT 3D8 scFv:llä. Kaiken kaikkiaan 3D8 VL voi korvata WT 3D8 scFv:n tehokkaaksi antiviraaliseksi proteiiniksi.
Biografia :
Yongjun Lee on suorittanut maisterin tutkinnon Sungkyunkwanin yliopistossa. Hänen tutkimusintressinsä koskee antiviraalista proteiinia (3D8 scFv-proteiini) käyttäen E. coli -ekspressiojärjestelmiä ja proteiinien kuljetusta veri-aivoesteiden läpi.