Cíl: Naším cílem bylo posoudit podíl 6′,7′-dihydroxybergamottinu (DHB) na inhibičním účinku grapefruitové šťávy vůči střevnímu cytochromu P450 (CYP) 3A4.
Metody: Z grapefruitové šťávy byl centrifugací, filtrací a opakovaným promytím částic vodou připraven vodný extrakt. Koncentrace různých furanokumarinů v tomto „séru“ grapefruitové šťávy a v celé grapefruitové šťávě byly měřeny pomocí HPLC a jejich identita byla potvrzena pomocí kapalinové chromatografie-tandemové hmotnostní spektrometrie. Pěti zdravým dobrovolníkům byla podána jedna tableta felodipinu (10 mg) s celou grapefruitovou šťávou, sérem obsahujícím pomerančovou šťávu nebo čistou pomerančovou šťávou (kontrola). Farmakokinetické výsledky felodipinu byly hodnoceny nekompartmentovými metodami. Účinky séra a purifikovaného DHB (ve stejných koncentracích, jaké byly naměřeny v séru obsahujícím pomerančovou šťávu použitém v klinické studii) byly porovnány in vitro s ohledem na (1) reverzibilní a na mechanismu založenou inhibici katalytické aktivity CYP3A4 exprimovaného komplementární deoxyribonukleovou kyselinou a (2) ztrátu imunoreaktivního proteinu CYP3A4 v závislosti na čase v modifikovaných buňkách Caco-2.
Výsledky: Koncentrace DHB v séru byla srovnatelná s koncentrací naměřenou v celé grapefruitové šťávě (38 mikromol/l oproti 43 mikromol/l) a koncentrace ostatních známých furanokumarinů byly hluboko pod nejnižší publikovanou koncentrací potřebnou k 50% inhibici katalytické aktivity. Ve srovnání s čistou pomerančovou šťávou sérum obsahující pomerančovou šťávu významně zvýšilo medián plochy pod křivkou plazmatické koncentrace v čase 1,9krát (P =,04) a zvýšilo maximální koncentraci 1,7krát (P =,01). In vitro mělo sérum a purifikovaný DHB podobné inhibiční účinky vůči aktivitě CYP3A4, pokud jde o reverzibilní inhibici (95% interval spolehlivosti, 85 % +/- 5,7 %, resp. 75 % +/- 4,5 %) a inhibici založenou na mechanismu po 15minutové preinkubaci (95% interval spolehlivosti, 79 % +/- 6,8 %, resp. 78 % +/- 5,7 %). V buňkách Caco-2 byl časově zprůměrovaný rozsah úbytku proteinů CYP3A4 způsobený sérem a purifikovaným DHB stejný (43 %).
Závěr: Interakci mezi sérem grapefruitové šťávy a felodipinem lze z velké části přičíst DHB. To potvrzuje, že DHB významně přispívá k účinku grapefruitové šťávy.