2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin a Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Korejská republika
Postery & Přijaté abstrakty: Appli Micro
Abstrakt :
3D8 single chain variable fragment (scFv) je rekombinantní protilátka. 3D8 scFv se skládá z variabilních domén těžkého řetězce (VH) a variabilních domén lehkého řetězce (VL), které jsou spojeny flexibilním peptidovým linkerem. 3D8 scFv byl izolován z myší náchylných k autoimunitě MRL-lpr/lpr. Má DNázovou a RNázovou aktivitu bez výrazné sekvenční specifity. Internalizuje se pomocí endocytózy zprostředkované kaveolou a hromadí se v cytosolu. V předchozích studiích vykazoval WT 3D8 scFv antivirové účinky proti viru pseudorabies (PRV) a viru herpes simplex typu 1 (HSV-1). Stejně jako WT 3D8 scFv může 3D8 VL hydrolyzovat substráty DNA a RNA a také proniká do cytoplazmy. V této studii jsem porovnal hydrolyzační aktivitu DNA a RNA mezi 3D8 VL a WT 3D8 scFv. Stabilitu 3D8 VL jsem měřila v různých rozmezích pH a teplot pomocí testu FRET (fluorescenční rezonanční přenos energie). Potvrdil jsem také aktivitu průniku do cytoplazmy přes buněčnou membránu a prokázal jsem, že 3D8 VL nemá cytotoxický účinek proti hostitelské buňce, který prokázal WT 3D8 scFv (in vitro). Protein 3D8 VL byl detekován v několika orgánech (játra, plíce a mozek) a v krvi, když jsem protein aplikoval myším intraperitoneální injekcí. Pomocí zobrazování in vivo jsem potvrdil, že 3D8 scFv a VL se mohou vstřebávat do krve a poté cirkulovat do celého těla a nakonec se dostanou do několika orgánů. Výsledky ukazují, že 3D8 VL má podobné biochemické a biologické vlastnosti jako WT 3D8 scFv. Souhrnně lze říci, že 3D8 VL může nahradit WT 3D8 scFv jako účinný antivirový protein.
Životopis :
Yongjun Lee získal magisterský titul na Sungkyunkwan University. Jeho výzkumný zájem se týká antivirového proteinu (3D8 scFv protein) s využitím expresních systémů E. coli a transportu proteinů přes hematoencefalickou bariéru.