ABSTRACT
Medlemmer af ABC-F-underfamilien af ATP-bindende kassetteproteiner formidler resistens over for en bred vifte af klinisk vigtige antibiotikaklasser, der er rettet mod ribosomet hos Gram-positive patogener. Den mekanisme, hvormed disse proteiner virker, har længe været genstand for kontroverser, med to konkurrerende hypoteser, der hver især har fået betydelig støtte: antibiotikaudstrømning versus ribosomal beskyttelse. Her rapporterer vi om undersøgelser, der anvender en kombination af bakteriologiske og biokemiske teknikker til at afdække disse proteiners resistensmekanisme, og vi fremlægger flere beviser, der tilsammen giver klar støtte til hypotesen om ribosomal beskyttelse. Vi viser især, at tilsætning af rensede ABC-F-proteiner til et in vitro-oversættelsesforsøg medfører dosisafhængig redning af oversættelsen, og viser, at sådanne proteiner er i stand til at fortrænge antibiotika fra ribosomet in vitro. Så vidt vi ved, udgør disse eksperimenter det første direkte bevis for, at ABC-F-proteiner formidler antibiotikaresistens gennem ribosomal beskyttelse.
IMPORTANCE Antimikrobiel resistens hører til blandt de største trusler, som menneskers sundhed i øjeblikket står over for. Opklaring af de mekanismer, hvormed mikroorganismer modstår virkningen af antibiotika, er central for at forstå biologien bag dette fænomen og har potentiale til at informere om udviklingen af nye lægemidler, der kan blokere eller omgå resistens. Medlemmer af ABC-F-familien, som omfatter lsa(A), msr(A), optr(A) og vga(A), giver tilsammen resistens over for en bredere vifte af klinisk betydningsfulde antibiotikaklasser end nogen anden familie af resistensdeterminanter, selv om deres virkningsmekanisme har været kontroversiel siden deres opdagelse for 25 år siden. Her præsenterer vi det første direkte bevis for, at proteiner fra ABC-F-familien virker til at beskytte bakterieribosomet mod antibiotika-medieret hæmning.