2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin og Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Resumé :
3D8 single chain variable fragment (scFv) er et rekombinant antistof. 3D8 scFv består af variable tunge kædedomæner (VH) og variable lette kædedomæner (VL), der er forbundet af en fleksibel peptidlinker. 3D8 scFv blev isoleret fra autoimmune MRL-lpr/lpr-mus, der er udsat for autoimmunitet. Den har DNase- og RNase-aktiviteter uden væsentlig sekvensspecificitet. Det internaliseres ved caveola-formet endocytose og ophobes i cytosolen. I tidligere undersøgelser har WT 3D8 scFv vist antivirale virkninger mod pseudorabiesvirus (PRV) og herpes simplex virus type 1 (HSV-1). Ligesom WT 3D8 scFv kan 3D8 VL hydrolyserer DNA- og RNA-substrater og trænger også ind i cytoplasmaet. I denne undersøgelse har jeg sammenlignet den DNA- og RNA-hydrolyserende aktivitet mellem 3D8 VL og WT 3D8 scFv. Jeg har målt stabiliteten af 3D8 VL i en række forskellige pH-områder og temperaturer ved hjælp af FRET-assay (Fluorescensresonansenergioverførsel). Jeg bekræftede også celleindtrængningsaktiviteten i cytoplasmaet gennem cellemembranen, og jeg påviste, at 3D8 VL ikke har nogen cytotoksisk virkning mod værtscelle som vist af WT 3D8 scFv (in vitro). 3D8 VL-protein blev påvist i flere organer (lever, lunge og hjerne) og i blodet, da jeg injicerede proteinet til mus ved intraperitoneal injektion. Ved hjælp af in vivo billeddannelse har jeg bekræftet, at 3D8 scFv og VL kunne absorberes i blodet og derefter cirkulere i hele kroppen og endelig nåede de til flere organer. Resultaterne viser, at 3D8 VL har lignende biokemiske og biologiske egenskaber som WT 3D8 scFv. Samlet set kan 3D8 VL erstatte WT 3D8 scFv som et potent antiviralt protein.
Biografi :
Yongjun Lee har modtaget sin kandidatgrad fra Sungkyunkwan University. Hans forskningsinteresse drejer sig om antiviralt protein (3D8 scFv-protein) ved hjælp af E. coli-ekspressionssystemer og proteinernes transport gennem blod-hjernebarrieren.