Poliovirus (PV)-inficerede celler gennemgår en omfattende proliferation og omlægning af intracellulære glatte membraner for at generere vesikler, hvorpå viral RNA-replikation finder sted. PV-proteinerne 2C og 2BC er kendt for at være tæt forbundet med disse membranøse replikationskomplekser og er blevet foreslået at være involveret i dannelsen af disse virusinducerede vesikler. Vi har udtrykt disse proteiner og proteiner med mutationer i de putative nukleotid-(NTP)-bindingsmotiver i humane celler ved hjælp af rekombinante vaccinia-virus og T7 RNA-polymerase-dirigeret transkription. For at fastslå disse proteiners subcellulære lokaliseringsegenskaber i fravær af andre PV-proteiner og for at afgøre, om de inducerede ultrastrukturelle ændringer, blev celler, der udtrykker 2C- og 2BC-proteiner, undersøgt ved immunofluorescensmikroskopi (IF), elektronmikroskopi (EM) og immuno-EM (IEM). Cytoplasmaet i celler, der udtrykker enten 2C eller 2BC, udviste vesikler med en diameter på 50-350 nm, som lignede dem, der blev fundet i PV-inficerede celler. Både 2C og 2BC var associeret med disse vesikler. Mutationer i det formodede NTP-bindingsmotiv havde ingen indflydelse på vesikelinduktion af 2C eller 2BC. På trods af den membranreorganisering og vesikeldannelse, der blev induceret af 2C- og 2BC-proteinerne, blev der ikke observeret nogen øget syntese af lipid. Guanidinhydrochlorid i en koncentration, der hæmmer PV-replikation, havde ingen signifikante virkninger på IF-mønstrene for hverken 2C eller 2BC. En yderligere fremtrædende ændring i celler, der udtrykker 2C, men ikke 2BC, var dannelsen af omfattende rørformede membranstrukturer med et myelinlignende arrangement i lumenet af det ru endoplasmatiske reticulum. IEM-analyser viste, at 2C var associeret med disse strukturer. I tilstedeværelse af andre PV-proteiner blev de rørformede membranstrukturer, der blev induceret af 2C, ikke påvist. Disse strukturer observeres ikke i poliovirus-inficerede celler, men indikerer sandsynligvis en ny egenskab ved 2C, som inducerer en kompleks interaktion med intracellulære membraner.