2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin und Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Abstract :
3D8 single chain variable fragment (scFv) ist ein rekombinanter Antikörper. 3D8 scFv besteht aus variablen Domänen der schweren Kette (VH) und variablen Domänen der leichten Kette (VL), die durch einen flexiblen Peptidlinker verbunden sind. 3D8 scFv wurde aus der zur Autoimmunität neigenden MRL-lpr/lpr-Maus isoliert. Es besitzt DNase- und RNase-Aktivitäten ohne signifikante Sequenzspezifität. Es wird durch Caveola-vermittelte Endozytose internalisiert und im Zytosol akkumuliert. In früheren Studien zeigte WT 3D8 scFv eine antivirale Wirkung gegen das Pseudorabies-Virus (PRV) und das Herpes-Simplex-Virus Typ-1 (HSV-1). Wie WT 3D8 scFv kann 3D8 VL DNA- und RNA-Substrate hydrolysieren und dringt auch in das Zytoplasma ein. In dieser Studie habe ich die DNA- und RNA-Hydrolyseaktivität zwischen 3D8 VL und WT 3D8 scFv verglichen. Ich habe die Stabilität von 3D8 VL in verschiedenen pH-Bereichen und bei verschiedenen Temperaturen mit Hilfe des FRET-Tests (Fluoreszenzresonanzenergietransfer) gemessen. Ich bestätigte auch die Zellpenetrationsaktivität durch die Zellmembran ins Zytoplasma und zeigte, dass 3D8 VL keine zytotoxische Wirkung gegen die Wirtszelle hat, wie dies bei WT 3D8 scFv (in vitro) der Fall war. Das 3D8 VL-Protein wurde in mehreren Organen (Leber, Lunge und Gehirn) und im Blut nachgewiesen, als ich das Protein Mäusen durch intraperitoneale Injektion verabreichte. Mit Hilfe der In-vivo-Bildgebung habe ich bestätigt, dass 3D8 scFv und VL in das Blut aufgenommen werden konnten und dann im ganzen Körper zirkulierten und schließlich mehrere Organe erreichten. Die Ergebnisse zeigen, dass 3D8 VL ähnliche biochemische und biologische Eigenschaften wie WT 3D8 scFv hat. Zusammengenommen kann 3D8 VL als Ersatz für WT 3D8 scFv ein wirksames antivirales Protein sein.
Biografie:
Yongjun Lee hat seinen Master-Abschluss an der Sungkyunkwan University gemacht. Sein Forschungsinteresse gilt dem antiviralen Protein (3D8 scFv-Protein) unter Verwendung von E. coli-Expressionssystemen und dem Transport des Proteins durch die Blut-Hirn-Schranke.