Blueberry Supplementation Improves Memory in Older Adults | CDhistory

Procedure

Prospektive Teilnehmer wurden mit strukturierten Interview-Instrumenten bewertet, um die Eignung für die Aufnahme in die Studie zu bestimmen. Mit dem Fragebogen zur akademischen und medizinischen Vorgeschichte (20) wurden demografische Daten und Informationen zum akademischen Abschluss, zu aktuellen und früheren Erkrankungen sowie zum Medikamenten- und Drogenkonsum erhoben. Personen mit Diabetes, Drogenmissbrauch oder diagnostizierten psychiatrischen oder neurologischen Erkrankungen wurden ebenso ausgeschlossen wie Personen, die Medikamente einnahmen, die sich auf die Ergebnisse auswirken könnten, wie z. B. Benzodiazepine. Der Grad der Gedächtnisbeeinträchtigung wurde mit dem Clinical Dementia Rating (CDR) ermittelt, bei dem der Teilnehmer und ein Informant (in der Regel der Ehepartner oder ein erwachsenes Kind) Angaben zu Art und Ausmaß der kognitiven Beeinträchtigung machen, wie sie sich bei alltäglichen Aktivitäten zu Hause und in der Gemeinschaft zeigt (21). Bewertet wurden die Bereiche Gedächtnis, Orientierung, Problemlösung, Gemeinschaftsangelegenheiten, häusliche Aktivitäten und persönliche Pflege, und die Bewertungen für jeden Bereich trugen zu einer globalen CDR-Klassifizierung bei, wobei der Gedächtnisbereich am stärksten gewichtet wurde. Die CDR-Klassifizierung umfasst keine Beeinträchtigung, leichte Beeinträchtigung sowie leichte, mittelschwere und schwere Demenz. Wir nahmen Personen mit einer leichten Beeinträchtigung auf, die einer leichten kognitiven Beeinträchtigung entspricht, und schlossen diejenigen aus, deren CDR-Klassifizierung keine Beeinträchtigung anzeigte, sowie diejenigen mit leichter, mittlerer und schwerer Demenz. Zusätzlich zur globalen CDR-Klassifizierung wurde die Summe der Boxen-Scores ermittelt. Diese Punktzahl stellte die arithmetische Summe der Kategorienbewertungen in den sechs Funktionsbereichen dar und diente als Mittel zur Quantifizierung des Gesamtniveaus der funktionellen Beeinträchtigung (22).

Wildheidelbeersaft wurde von Van Dyk’s Health Juice Products Ltd (Caledonia, Nova Scotia, Kanada) aus reifen, gefrorenen Wildheidelbeeren (Vaccinium angustifolium Aiton) kommerziell hergestellt und für diese Untersuchung von der Wild Blueberry Association of North America, Old Town, ME, USA, zur Verfügung gestellt. Die Beeren wurden aufgetaut, gepresst, gefiltert, pasteurisiert und dann in Ein-Liter-Braunglasflaschen abgefüllt. Ein Kilogramm Heidelbeeren ergab etwa 735 ml Saft einfacher Stärke.

Analysen wurden an Proben des in dieser Studie verwendeten Saftes durchgeführt. Die häufigsten gelösten Bestandteile im Heidelbeersaft waren Glukose, Fruktose sowie Äpfel- und Zitronensäure (23). Die kolorimetrische Messung der Gesamtphenole im Saft ergab eine Konzentration von 2,38 g Gallussäureäquivalenten/L (24). Die wichtigsten Phenole im Saft waren der Hydroxyzimtsäureester Chlorogensäure mit ca. 734 mg/L und die flavonoiden Anthocyane mit 877 mg Cyanidin-3-glucosid-Äquivalenten/L Saft, basierend auf der an anderer Stelle beschriebenen HPLC-Analyse (25). Während der Lagerung kann es zu einem Verlust an Anthocyanen und anderen Phenolen im Heidelbeersaft kommen. Während der etwa dreimonatigen Lagerung der Saftproben wurden Verluste an Gesamtphenolen und Anthocyanen von 23 % bzw. 20 % für Saft festgestellt, der unter Kühlung in Bernsteinflaschen gelagert wurde.

Die tägliche Verzehrmenge wurde zwischen 6 ml/kg und 9 ml/kg gehalten, indem ein Dosierungsschema verwendet wurde, das sich nach dem Körpergewicht richtete. Personen mit einem Gewicht von 54 bis 64 kg erhielten 444 ml/Tag, Personen mit einem Gewicht von 65 bis 76 kg nahmen 532 ml/Tag und Personen mit einem Gewicht von 77 bis 91 kg 621 ml/Tag zu sich. Tabelle 1 enthält Daten zur Aufnahme von Phenolen und Anthocyanen, die anhand von Proben des in dieser Studie verwendeten Heidelbeersafts ermittelt wurden. Dieser Dosierungsbereich entsprach der in Humanstudien mit Concord-Traubensaft verwendeten Menge (19,26). Die Studienteilnehmer wussten nicht, welches Ergänzungsmittel sie erhielten, und wurden darüber informiert, dass es sich bei dem Studienprodukt um Traubensaft, Blaubeersaft oder ein Beeren-Placebo-Getränk handeln könnte. Der Saft wurde vor der Verteilung in einem Kühlraum bei 4 °C gelagert. Die Probanden wurden angewiesen, den Saft zu Hause zu kühlen und die vorgeschriebenen Tagesmengen in gleichen, geteilten Dosen zu den Morgen-, Mittags- und Abendmahlzeiten einzunehmen. Um das Risiko einer Fehlmessung zu minimieren, stellten wir Behälter zur Verfügung, auf denen die einzelnen Dosierungen für jeden Probanden markiert waren. Der Zeitraum der Intervention betrug 12 Wochen. Obwohl dies bei Menschen einen viel geringeren Prozentsatz der gesamten Lebensspanne ausmacht als bei Nagetieren, erwarteten wir, dass die biologische Reaktion im Wesentlichen im gleichen Zeitrahmen eintreten würde, da frühere Studien an Menschen und Tieren übereinstimmten. Die Einnahme von Heidelbeeren über einen ähnlichen Zeitraum hat in Experimenten mit älteren Tieren Verbesserungen der kognitiven Leistung gezeigt (12,14). Darüber hinaus haben Humanstudien dieser Dauer mit Beerensaft positive Veränderungen bei Entzündungsmarkern und der antioxidativen Kapazität gezeigt (26).

Die Probanden erhielten bei der Erstuntersuchung und bei einer Zwischenuntersuchung in Woche 6 der Intervention Saft in Flaschen. Die Einhaltung des Verzehrprotokolls und die Nebenwirkungen wurden bei wöchentlichen telefonischen Kontakten und durch direkte Befragung bei den Zwischen- und Abschlussbesuchen bewertet. Die Probanden wurden angewiesen, während der gesamten Studiendauer Beerenfrüchte und -säfte sowie Beerenextrakte zu meiden, und erhielten eine Liste von Lebensmitteln und Nahrungsergänzungsmitteln, die sie meiden sollten. Diese Liste enthielt unter anderem Früchte und Getränke wie Blaubeeren, Brombeeren, Kirschen, Trauben, Traubensaft, Granatäpfel, Erdbeeren und Wein.

Die Untersuchungen wurden zu Beginn der Behandlung und in der letzten Woche der Intervention durchgeführt. Die primären Ergebnisse waren Messungen der Gedächtnisfunktion, darunter der Verbal Paired Associate Learning Test (V-PAL; 27) und der California Verbal Learning Test (CVLT; 28). Mit Hilfe von Aufgaben zu paarweisen Assoziationen konnten Personen mit fortschreitender Neurodegeneration identifiziert und eine Sensibilität für frühe und fortgeschrittene Alzheimer-Krankheit nachgewiesen werden (29), und der V-PAL hat sich als sensibel für entwicklungsbedingte Leistungsveränderungen bei jungen, mittelalten und älteren Frauen erwiesen (30). Bei dieser Aufgabe muss die Testperson neue Assoziationen zwischen häufigen ein- und zweisilbigen, semantisch nicht verwandten Wörtern (z. B. Hilfe-Jahre) lernen. Der V-PAL-Leistungswert stellt die kumulative Anzahl der richtigen Antworten dar, die über vier Lern- und Testversuche summiert werden. Der CVLT ist eine weit verbreitete Aufgabe zum Lernen und Abrufen von Listen, die sich als empfindlich gegenüber altersbedingten Gedächtnisveränderungen, MCI und Demenz erwiesen hat (31). Es handelt sich um eine 16 Punkte umfassende Liste gebräuchlicher Wörter, die in semantische Kategorien eingeteilt werden können. Es werden jedoch keine neuen Assoziationen verlangt. Zur Beurteilung des Behaltens der Wortliste wurde der Wert für den freien Abruf verwendet. Diese beiden verbalen Gedächtnistests wurden einbezogen, weil sie etwas unterschiedliche kognitive Anforderungen stellen. Während der V-PAL die Bildung neuer Assoziationen erfordert, geht es beim CVLT um das Erfassen und Behalten einer Liste einzelner Wörter. Beide Tests beruhen auf der Verarbeitung im Hippocampus, obwohl die Aufgabe mit den gepaarten Assoziationen ressourcenintensiver und möglicherweise empfindlicher gegenüber kognitiven Alterungseffekten ist (32).

Alternative Formen jeder Gedächtnisaufgabe wurden zu Beginn und am Ende der Studie verwendet, so dass der spezifische Inhalt der Testaufgaben nicht wiederholt wurde. Die Verwendung alternativer Formen schwächt die mit Test-Retest-Designs verbundenen Übungseffekte erheblich ab, insbesondere bei Gedächtnistests (33). Die Verwendung alternativer Formulare kann jedoch Leistungsgewinne beim Wiederholungstest, die mit prozeduralen Übungseffekten, d. h. mit der Vertrautheit mit dem Testverfahren, zusammenhängen, nicht ausschließen (34).

Der Gemütszustand wurde mit der Geriatric Depression Scale (GDS; 35), einem 30 Punkte umfassenden Inventar zur Bewertung von Depressionssymptomen bei älteren Erwachsenen, erfasst. Außerdem wurden Gewicht und Taillenumfang gemessen und Nüchternblutproben für die Bestimmung der Serumglukose- und Insulinwerte durch das biochemische Labor des General Clinical Research Center (GCRC) an der Universität von Cincinnati entnommen.

Die primären statistischen Analysen umfassten t-Tests mit abhängigen Stichproben, um die Veränderung der Gedächtnisleistung, der Stimmung, der Körperanthropometrie und der Stoffwechselparameter vom Ausgangswert bis zum letzten Besuch zu bestimmen. Wir setzten die α-Wahrscheinlichkeit für Fehler vom Typ 1 auf 0,05, um statistisch signifikante Effekte zu melden. In Anbetracht des vorläufigen Charakters dieser Studie haben wir Trends bei α ≤ 0,10 angegeben. Wir berechneten auch Cohen’s d Effektgrößenstatistiken (36) für diese Analysen, die als klein (0,2), mittel (0,5) und groß (0,8) charakterisiert werden.

Aufgrund von Bedenken hinsichtlich des Leistungsgewinns bei wiederholten Gedächtnistests führten wir auch Kovarianzanalysen (ANCOVA) durch, um mögliche prozedurale Übungseffekte zu kontrollieren, indem wir die Gedächtnisleistungen der Heidelbeerstichprobe mit denen der Trauben-Placebostichprobe aus der Begleitstudie verglichen. Bei diesen Analysen wurde die Wirkung der Intervention isoliert, indem die Ergebniswerte des letzten Besuchs als abhängiges Maß und die entsprechenden Werte des Ausgangsbesuchs als kovariates Maß verwendet wurden (37). Cohens f (36) stellt die statistische Effektgröße für diese Analysen dar, die klein (0,1), mittel (0,25) und groß (0,40) sind.