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El blastocisto humano: número de células, muerte y asignación durante el desarrollo tardío de la preimplantación in vitro

Posted on septiembre 21, 2021 by admin

Se observó el desarrollo de 181 embriones humanos sobrantes, incluyendo tanto los fecundados normalmente como los anormales, desde el día 2 hasta el día 5, 6 ó 7 in vitro. 63/149 (42%) embriones fecundados normalmente alcanzaron el estadio de blastocisto en el día 5 o 6. El número de células totales, del trofectodermo (TE) y de la masa celular interna (MCI) se analizó mediante el etiquetado diferencial de los núcleos con fluorocromos específicos de polinucleótidos. Los núcleos del ET se marcaron con un fluorocromo durante la lisis inmunológica, antes de fijar el embrión y marcar ambos conjuntos de núcleos con un segundo fluorocromo (Handyside y Hunter, 1984, 1986). Los blastocistos recién expandidos y fecundados normalmente en el día 5 tenían un total de 58,3 +/- 8,1 células, que aumentaron a 84,4 +/- 5,7 y 125,5 +/- 19 en los días 6 y 7, respectivamente. El número de células TE fue similar en los días 5 y 6 (37,9 +/- 6,0 y 40,3 +/- 5,0, respectivamente) y se duplicó el día 7 (80,6 +/- 15,2). Por el contrario, el número de células MCI se duplicó entre los días 5 y 6 (20,4 +/- 4,0 y 41,9 +/- 5,0, respectivamente) y permaneció prácticamente sin cambios el día 7 (45,6 +/- 10,2). Hubo una muerte celular generalizada tanto en el TE como en el MCI, como lo demuestra la fragmentación de los núcleos, que aumentó sustancialmente en el día 7. Estos resultados se comparan con el número de células en blastocistos morfológicamente anormales y blastocistos derivados de embriones anormalmente fertilizados. También se examinaron los núcleos de los embriones detenidos. El número de células TE y MCI asignadas en los blastocistos fecundados normalmente parece ser similar al número asignado en el ratón. Sin embargo, a diferencia del ratón, la proporción de células MCI sigue siendo mayor, a pesar de la muerte celular en ambos linajes.

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