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Los vectores del virus adeno-asociado serotipados con la cápside AAV8 son más eficientes que los serotipos AAV-1 o -2 para la administración generalizada de genes en el cerebro de ratones neonatos

Posted on octubre 14, 2021 by admin

Los vectores del virus adeno-asociado (AAV) han adquirido una posición preeminente en el campo de la administración de genes en el cerebro normal gracias a su capacidad para lograr una amplia transducción de neuronas y mediar en la expresión de genes a largo plazo sin toxicidad aparente. En animales adultos, la infusión directa de vectores AAV en el parénquima cerebral produce una transducción muy eficaz de las estructuras objetivo. Sin embargo, la administración global de AAV en el cerebro adulto ha sido un objetivo difícil de alcanzar. Por el contrario, se ha conseguido una amplia entrega global de genes mediante la inyección i.c.v. de AAV1 o AAV2 en neonatos. Entre los nuevos serotipos de AAV clonados y diseñados para la producción de vectores recombinantes, el AAV8 ha demostrado un enorme potencial para la administración de genes in vivo, con una transducción casi completa de muchos tejidos en roedores tras una infusión intravascular. Aquí comparamos la eficacia de un vector con serotipo AAV8 con la de los vectores con serotipo AAV1 y AAV2 en cuanto al alcance de la administración de genes en el cerebro tras la inyección neonatal en los ventrículos laterales. Todos los vectores codificaban la proteína verde fluorescente (GFP) bajo el control de un promotor híbrido de CMV/beta-actina de pollo con repeticiones terminales invertidas de AAV2, pero diferían entre sí en cuanto al tipo de cápside. Se inyectó un total de 6,8 x 10(10) copias del genoma en los ventrículos laterales de ratones de día 0 postnatal. Los ratones fueron sacrificados en el día 30 postnatal y se analizaron los cerebros para ver la distribución de las células positivas a la GFP. El AAV8 demostró ser más eficiente que los vectores AAV1 o AAV2 para la entrega de genes en todas las estructuras analizadas, incluyendo la corteza cerebral, el hipocampo, el bulbo olfativo y el cerebelo. Además, la intensidad de la expresión génica, evaluada mediante un lector de microarray, fue considerablemente mayor para el AAV8 en todas las estructuras analizadas. En conclusión, la mayor transducción lograda por el AAV8 en comparación con el AAV1 y el AAV2 indica que el AAV8 es el serotipo superior para la administración de genes en el SNC.

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