Segunda conferencia internacional sobre microbiología aplicada y microbios benéficos
del 23 al 25 de octubre de 2017 OSAKA, JAPÓN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin y Sukchan Lee
Universidad de Sunkyunkwan, República de Corea
Pósters &Resúmenes aceptados: Appli Micro
Resumen :
El fragmento variable de cadena simple (scFv) 3D8 es un anticuerpo recombinante. 3D8 scFv consta de dominios variables de cadena pesada (VH) y dominios variables de cadena ligera (VL) que están unidos por un enlazador peptídico flexible. El scFv 3D8 fue aislado de un ratón MRL-lpr/lpr propenso a la autoinmunidad. Tiene actividades de DNasa y RNasa sin una especificidad de secuencia significativa. Se internaliza por endocitosis mediada por caveola y se acumula en el citosol. En estudios anteriores, el WT 3D8 scFv mostró efectos antivirales contra el virus de la pseudorabia (PRV) y el virus del herpes simple tipo 1 (HSV-1). Al igual que WT 3D8 scFv, 3D8 VL podría hidrolizar sustratos de ADN y ARN y también penetra en el citoplasma. En este estudio, he comparado la actividad hidrolizadora de ADN y ARN entre 3D8 VL y WT 3D8 scFv. He medido la estabilidad de 3D8 VL en una variedad de rangos de pH y temperaturas utilizando el ensayo FRET (transferencia de energía por resonancia de fluorescencia). También confirmé la actividad de penetración celular en el citoplasma a través de la membrana celular y demostré que 3D8 VL no tiene ningún efecto citotóxico contra la célula huésped mostrado por WT 3D8 scFv (in vitro). La proteína 3D8 VL se detectó en varios órganos (hígado, pulmón y cerebro) y en la sangre, cuando inyecté la proteína al ratón por vía intraperitoneal. Utilizando imágenes in vivo, he confirmado que 3D8 scFv y VL pudieron ser absorbidos en la sangre y luego circularon a todo el cuerpo y finalmente llegaron a varios órganos. Los resultados indican que 3D8 VL tiene propiedades bioquímicas y biológicas similares a las de WT 3D8 scFv. En conjunto, 3D8 VL puede sustituir a WT 3D8 scFv para una potente proteína antiviral.
Biografía :
Yongjun Lee se licenció en la Universidad de Sungkyunkwan. Su interés de investigación es sobre la proteína antiviral (proteína 3D8 scFv) utilizando sistemas de expresión de E. coli y el transporte de proteínas a través de las barreras hematoencefálicas.