Las células infectadas por poliovirus (PV) experimentan una amplia proliferación y reordenamiento de las membranas lisas intracelulares para generar vesículas en las que se produce la replicación del ARN viral. Se sabe que las proteínas PV 2C y 2BC están estrechamente asociadas a estos complejos de replicación membranosa y se ha propuesto que participan en la formación de estas vesículas inducidas por el virus. Hemos expresado estas proteínas, y las proteínas con mutaciones en los motivos putativos de unión a nucleótidos (NTP), en células humanas utilizando virus vaccinia recombinantes y transcripción dirigida por la ARN polimerasa T7. Para conocer las propiedades de localización subcelular de estas proteínas en ausencia de otras proteínas PV y determinar si inducían cambios ultraestructurales, se examinaron las células que expresaban las proteínas 2C y 2BC mediante microscopía de inmunofluorescencia (IF), microscopía electrónica (EM) e inmuno-EM (IEM). El citoplasma de las células que expresaban 2C o 2BC presentaba vesículas de 50-350 nm de diámetro, que se parecían a las encontradas en las células infectadas por PV. Tanto la 2C como la 2BC estaban asociadas a estas vesículas. Las mutaciones en el motivo putativo de unión a NTP no afectaron a la inducción de vesículas por 2C o 2BC. A pesar de la reorganización de la membrana y la formación de vesículas inducida por las proteínas 2C y 2BC, no se observó una mayor síntesis de lípidos. El clorhidrato de guanidina, a una concentración que inhibe la replicación de PV, no tuvo efectos significativos en los patrones de FI de 2C o 2BC. Una alteración prominente adicional en las células que expresan 2C, pero no 2BC, fue la formación de extensas estructuras de membrana tubular con una disposición similar a la mielina en el lumen del retículo endoplásmico rugoso. Los análisis de IEM mostraron que la 2C estaba asociada a estas estructuras. En presencia de otras proteínas PV, no se detectaron las estructuras de membrana tubular inducidas por la 2C. Estas estructuras no se observan en las células infectadas por poliovirus, pero probablemente indican una nueva propiedad de 2C que induce una compleja interacción con las membranas intracelulares.