Les teneurs en sucres et en acides organiques sont des facteurs majeurs de la saveur des fruits de la tomate et sont des traits de sélection importants. Nous fournissons ici un protocole amélioré pour la quantification précise des principaux sucres, glucose et fructose, et des acides organiques, acide citrique et acide malique, présents dans la tomate. L’extrait de tomate est dopé avec du lactose et de l’acide tricarballylique comme standards internes et chargé sur une colonne d’extraction en phase solide (EPS) NH2. Les sucres apparaissent dans le flux et sont ensuite analysés par HPLC à l’aide d’une colonne Nucleodur NH2 et d’un détecteur d’indice de réfraction. Les acides organiques se lient à la colonne SPE et sont élués avec de l’acide phosphorique 400?mM. Pour l’analyse, les acides organiques sont séparés par HPLC en utilisant une colonne Nucleodur C18ec et détectés par absorption UV à 210?nm. La méthode présente une excellente reproductibilité inter et intra-journalière pour le glucose, le fructose et l’acide citrique avec des écarts types de 1-5%. La quantification de l’acide citrique par HPLC et GC-MS a montré un accord parfait avec une déviation de moins de 3%.