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Le blastocyste humain : nombre de cellules, mort et allocation pendant le développement préimplantatoire tardif in vitro

Posted on septembre 21, 2021 by admin

Le développement de 181 embryons humains surnuméraires, comprenant à la fois des embryons normalement et anormalement fécondés, a été observé du jour 2 au jour 5, 6 ou 7 in vitro. 63/149 (42%) embryons normalement fécondés ont atteint le stade de blastocyste au jour 5 ou 6. Le nombre de cellules totales, de cellules du trophectoderme (TE) et de cellules de la masse cellulaire interne (MCI) a été analysé par marquage différentiel des noyaux avec des fluorochromes spécifiques des polynucléotides. Les noyaux TE ont été marqués avec un fluorochrome pendant la lyse immunochirurgicale, avant de fixer l’embryon et de marquer les deux ensembles de noyaux avec un second fluorochrome (Handyside et Hunter, 1984, 1986). Les blastocystes normalement fécondés nouvellement développés au jour 5 contenaient un total de 58,3 +/- 8,1 cellules, qui ont augmenté à 84,4 +/- 5,7 et 125,5 +/- 19 aux jours 6 et 7, respectivement. Le nombre de cellules TE était similaire aux jours 5 et 6 (37,9 +/- 6,0 et 40,3 +/- 5,0, respectivement), puis a doublé au jour 7 (80,6 +/- 15,2). En revanche, le nombre de cellules ICM a doublé entre les jours 5 et 6 (20,4 +/- 4,0 et 41,9 +/- 5,0, respectivement) et est resté pratiquement inchangé au jour 7 (45,6 +/- 10,2). Il y a eu une mort cellulaire généralisée dans le TE et l’ICM, comme en témoigne la fragmentation des noyaux, qui a considérablement augmenté au jour 7. Ces résultats sont comparés au nombre de cellules dans les blastocystes morphologiquement anormaux et les blastocystes dérivés d’embryons anormalement fécondés. Les noyaux des embryons arrêtés ont également été examinés. Le nombre de cellules TE et ICM allouées dans les blastocystes normalement fécondés semble être similaire aux nombres alloués chez la souris. Cependant, contrairement à la souris, la proportion de cellules ICM reste plus élevée, malgré la mort cellulaire dans les deux lignées.

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