2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPON
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin et Sukchan Lee
Université de Sungkyunkwan, République de Corée
Posters &Résumés acceptés : Appli Micro
Résumé :
Le fragment variable à chaîne unique (scFv) 3D8 est un anticorps recombinant. 3D8 scFv se compose de domaines de chaîne lourde variable (VH) et de domaines de chaîne légère variable (VL) qui sont liés par un lieur peptidique flexible. Le scFv 3D8 a été isolé à partir de souris MRL-lpr/lpr sujettes à l’auto-immunité. Il possède des activités DNase et RNase sans spécificité de séquence significative. Il s’internalise par endocytose médiée par les cavités et s’accumule dans le cytosol. Dans des études précédentes, le scFv 3D8 WT a montré des effets antiviraux contre le virus de la pseudo-rage (PRV) et le virus de l’herpès simplex de type 1 (HSV-1). Comme le scFv 3D8 WT, le scFv 3D8 VL peut hydrolyser des substrats d’ADN et d’ARN et il pénètre également dans le cytoplasme. Dans cette étude, j’ai comparé l’activité d’hydrolyse de l’ADN et de l’ARN entre 3D8 VL et WT 3D8 scFv. J’ai mesuré la stabilité de 3D8 VL dans une variété de pH et de températures en utilisant le test FRET (Fluorescence resonance energy transfer). J’ai également confirmé l’activité de pénétration cellulaire dans le cytoplasme à travers la membrane cellulaire et j’ai démontré que 3D8 VL n’a pas d’effet cytotoxique sur la cellule hôte, comme le montre WT 3D8 scFv (in vitro). La protéine 3D8 VL a été détectée dans plusieurs organes (foie, poumon et cerveau) et dans le sang, lorsque j’ai injecté la protéine à la souris par injection intra-péritonéale. En utilisant l’imagerie in vivo, j’ai confirmé que le scFv 3D8 et le VL pouvaient être absorbés dans le sang, puis circuler dans tout le corps et enfin atteindre plusieurs organes. Les résultats indiquent que 3D8 VL a des propriétés biochimiques et biologiques similaires à celles de WT 3D8 scFv. Pris ensemble, 3D8 VL peut être remplacé WT 3D8 scFv pour une protéine antivirale puissante.
Biographie :
Yongjun Lee a reçu sa maîtrise de l’Université Sungkyunkwan. Ses intérêts de recherche portent sur la protéine antivirale (protéine 3D8 scFv) en utilisant des systèmes d’expression E. coli et le transport des protéines à travers les barrières hémato-encéphaliques.