Les cellules infectées par le poliovirus (PV) subissent une prolifération importante et un réarrangement des membranes lisses intracellulaires pour générer des vésicules sur lesquelles se produit la réplication de l’ARN viral. Les protéines PV 2C et 2BC sont connues pour être étroitement associées à ces complexes membranaires de réplication et il a été proposé qu’elles soient impliquées dans la formation de ces vésicules induites par le virus. Nous avons exprimé ces protéines, ainsi que des protéines présentant des mutations dans les motifs de liaison des nucléotides (NTP) putatifs, dans des cellules humaines en utilisant des virus de la vaccine recombinants et une transcription dirigée par l’ARN polymérase T7. Pour vérifier les propriétés de localisation subcellulaire de ces protéines en l’absence d’autres protéines PV et pour déterminer si elles induisent des changements ultrastructuraux, les cellules exprimant les protéines 2C et 2BC ont été examinées par microscopie à immunofluorescence (IF), microscopie électronique (EM) et immuno-EM (IEM). Le cytoplasme des cellules exprimant la protéine 2C ou 2BC présentait des vésicules de 50 à 350 nm de diamètre, qui ressemblaient à celles trouvées dans les cellules infectées par le virus PV. Le 2C et le 2BC étaient tous deux associés à ces vésicules. Les mutations du motif de liaison NTP putatif n’ont pas affecté l’induction de vésicules par le 2C ou le 2BC. Malgré la réorganisation de la membrane et la formation de vésicules induites par les protéines 2C et 2BC, aucune synthèse accrue de lipides n’a été observée. Le chlorhydrate de guanidine, à une concentration qui inhibe la réplication des PV, n’a pas eu d’effets significatifs sur les profils d’immunofluorescence des protéines 2C et 2BC. Une autre altération importante dans les cellules exprimant 2C, mais pas 2BC, était la formation de structures membranaires tubulaires étendues avec une disposition semblable à la myéline dans la lumière du réticulum endoplasmique rugueux. Les analyses IEM ont montré que 2C était associé à ces structures. En présence d’autres protéines PV, les structures membranaires tubulaires induites par le 2C n’ont pas été détectées. Ces structures ne sont pas observées dans les cellules infectées par le poliovirus, mais indiquent probablement une nouvelle propriété du 2C qui induit une interaction complexe avec les membranes intracellulaires.