Cél: Célunk az volt, hogy felmérjük a 6′,7′-dihidroxibergamottin (DHB) hozzájárulását a grapefruitlé gátló hatásához a bélrendszeri citokróm P450 (CYP) 3A4 felé.
Módszerek: A grapefruitléből vizes kivonatot állítottunk elő centrifugálással, szűréssel és a részecskék ismételt vízzel történő mosásával. A különböző furanokumarinok koncentrációját ebben a grapefruitlé “szérumban” és a teljes grapefruitlében HPLC-vel mértük, és azonosságukat folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometriával igazoltuk. Öt egészséges önkéntesnek egyetlen felodipin tablettát (10 mg) adtak egész grapefruitlével, narancslevet tartalmazó szérummal vagy sima narancslével (kontroll). A felodipin farmakokinetikai eredményeit nem kompartmentális módszerekkel értékelték. A szérum és a tisztított DHB (a klinikai vizsgálatban használt narancslevet tartalmazó szérumban mért koncentrációkkal megegyező koncentrációban) hatásait in vitro hasonlítottuk össze (1) a komplementer dezoxiribonukleinsavval expresszált CYP3A4 katalitikus aktivitásának reverzibilis és mechanizmuson alapuló gátlása és (2) az immunreaktív CYP3A4 fehérje időfüggő elvesztése tekintetében módosított Caco-2 sejtekben.
Eredmények: A DHB koncentrációja a szérumban összehasonlítható volt a teljes grapefruitlében mért koncentrációval (38 mikromol/l versus 43 mikromol/l), és a többi ismert furanokumarin koncentrációja jóval a katalitikus aktivitás 50%-os gátlásához szükséges legalacsonyabb publikált koncentráció alatt volt. A sima narancsléhez képest a narancslevet tartalmazó szérum szignifikánsan 1,9-szeresére növelte a plazma koncentráció-idő görbe alatti medián felodipin területet (P =,04) és 1,7-szeresére növelte a maximális koncentrációt (P =,01). In vitro a szérum és a tisztított DHB hasonló gátló hatással volt a CYP3A4 aktivitására mind a reverzibilis gátlás (95%-os konfidenciaintervallum, 85% +/- 5,7%, illetve 75% +/- 4,5%), mind a 15 perces előinkubációt követő mechanizmus alapú gátlás (95%-os konfidenciaintervallum, 79% +/- 6,8%, illetve 78% +/- 5,7%) tekintetében. Caco-2 sejtekben a szérum és a tisztított DHB által okozott CYP3A4 fehérjeveszteség időátlagolt mértéke azonos volt (43%).
Következtetés: A grapefruitlé szérum és a felodipin közötti kölcsönhatás nagyrészt a DHB-nek tulajdonítható. Ez igazolja, hogy a DHB a grapefruitlé-hatás fontos tényezője.