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La blastocisti umana: numero di cellule, morte e allocazione durante il tardo sviluppo preimpianto in vitro

Posted on Settembre 21, 2021 by admin

Lo sviluppo di 181 embrioni umani in eccesso, inclusi sia normalmente che anormalmente fertilizzati, è stato osservato dal giorno 2 al giorno 5, 6 o 7 in vitro. 63/149 (42%) embrioni normalmente fecondati hanno raggiunto lo stadio di blastocisti il giorno 5 o 6. Il numero di cellule totali, del trophectoderm (TE) e della massa cellulare interna (ICM) è stato analizzato mediante etichettatura differenziale dei nuclei con fluorocromi specifici per i polinucleotidi. I nuclei TE sono stati etichettati con un fluorocromo durante la lisi immunosurgica, prima di fissare l’embrione ed etichettare entrambi i gruppi di nuclei con un secondo fluorocromo (Handyside e Hunter, 1984, 1986). Le blastocisti normalmente fecondate al giorno 5 avevano un totale di 58,3 +/- 8,1 cellule, che aumentavano a 84,4 +/- 5,7 e 125,5 +/- 19 nei giorni 6 e 7, rispettivamente. Il numero di cellule TE era simile nei giorni 5 e 6 (37.9 +/- 6.0 e 40.3 +/- 5.0, rispettivamente) e poi raddoppiato il giorno 7 (80.6 +/- 15.2). Al contrario, il numero di cellule ICM è raddoppiato tra i giorni 5 e 6 (20.4 +/- 4.0 e 41.9 +/- 5.0, rispettivamente) ed è rimasto praticamente invariato il giorno 7 (45.6 +/- 10.2). C’era una morte cellulare diffusa sia nel TE che nell’ICM, come evidenziato dalla frammentazione dei nuclei, che è aumentata sostanzialmente al giorno 7. Questi risultati sono stati confrontati con il numero di cellule in blastocisti morfologicamente anormali e in blastocisti derivate da embrioni fecondati in modo anomalo. Sono stati esaminati anche i nuclei degli embrioni arrestati. Il numero di cellule TE e ICM assegnate nelle blastocisti normalmente fecondate sembra essere simile ai numeri assegnati nel topo. A differenza del topo, tuttavia, la proporzione di cellule ICM rimane più alta, nonostante la morte cellulare in entrambi i lignaggi.

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