I contenuti di zuccheri e di acidi organici sono fattori importanti per il sapore dei frutti di pomodoro e sono importanti caratteristiche di allevamento. Qui forniamo un protocollo migliorato per la quantificazione accurata dei principali zuccheri, glucosio e fruttosio, e degli acidi organici, acido citrico e acido malico, presenti nel pomodoro. L’estratto di pomodoro viene dosato con lattosio e acido tricarballico come standard interni e caricato su una colonna di estrazione in fase solida (SPE) NH2. Gli zuccheri appaiono nel flow-through e vengono successivamente analizzati tramite HPLC utilizzando una colonna Nucleodur NH2 e un rilevatore di indice di rifrazione. Gli acidi organici si legano alla colonna SPE e vengono eluiti con acido fosforico 400?mM. Per l’analisi, gli acidi organici sono separati mediante HPLC utilizzando una colonna Nucleodur C18ec e rilevati mediante assorbimento UV a 210 nm. Il metodo mostra un’eccellente riproducibilità intergiornaliera e intragiornaliera per glucosio, fruttosio e acido citrico con deviazioni standard del 1-5%. La quantificazione dell’acido citrico mediante HPLC e GC-MS ha mostrato un perfetto accordo con una deviazione inferiore al 3%.