2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin e Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Repubblica di Corea
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Abstract :
3D8 single chain variable fragment (scFv) è un anticorpo ricombinante. 3D8 scFv consiste in domini variabili della catena pesante (VH) e domini variabili della catena leggera (VL) che sono collegati da un linker peptidico flessibile. 3D8 scFv è stato isolato dal topo autoimmune MRL-lpr/lpr. Ha attività di DNasi e RNasi senza una significativa specificità di sequenza. Si internalizza per endocitosi caveolaemediata e si accumula nel citosol. In studi precedenti, WT 3D8 scFv ha mostrato gli effetti antivirali contro il virus della pseudorabbia (PRV) e il virus dell’herpes simplex di tipo 1 (HSV-1). Come la 3D8 scFv WT, la 3D8 VL potrebbe idrolizzare i substrati di DNA e RNA e penetrare anche nel citoplasma. In questo studio, ho confrontato l’attività di idrolisi del DNA e dell’RNA tra 3D8 VL e WT 3D8 scFv. Ho misurato la stabilità di 3D8 VL in una varietà di intervalli di pH e temperature utilizzando il test FRET (trasferimento di energia di risonanza in fluorescenza). Ho anche confermato l’attività di penetrazione cellulare nel citoplasma attraverso la membrana cellulare e ho dimostrato che la 3D8 VL non ha alcun effetto citotossico contro la cellula ospite mostrato dalla 3D8 scFv WT (in vitro). La proteina 3D8 VL è stata rilevata in diversi organi (fegato, polmone e cervello) e nel sangue, quando ho iniettato la proteina nel topo tramite iniezione intra-peritoneale. Usando l’imaging in vivo, ho confermato che la 3D8 scFv e la VL potrebbero essere assorbite nel sangue e poi fatte circolare in tutto il corpo e infine hanno raggiunto diversi organi. I risultati indicano che la 3D8 VL ha proprietà biochimiche e biologiche simili alla 3D8 scFv WT. Nel complesso, 3D8 VL può sostituire WT 3D8 scFv per una potente proteina antivirale.
Biografia :
Yongjun Lee ha ricevuto il suo Master dalla Sungkyunkwan University. Il suo interesse di ricerca riguarda la proteina antivirale (proteina 3D8 scFv) utilizzando sistemi di espressione E. coli e il trasporto delle proteine attraverso le barriere emato-encefaliche.