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Contents
- 1タンパク質のアセトン沈殿
- 1.1 理論
1.3.3.2 Practice
- 1.3 Safety
Acetone precipitation of proteins
タンパク質精製後、溶出バッファに保持されている化学物質を取り除き、下流の処理を可能にするタンパク質試料を濃縮することが必要である。
Theory
タンパク質はアセトンに不溶ですが（特に低温）、下流のタンパク質作業に干渉する可能性のある多くの小分子は溶けます。
実践
- 開始の約30分前に、沈殿させたいタンパク質溶液の4倍量のアセトンサンプルを-20℃の冷凍庫で冷やしておく。
- タンパク質サンプルに冷アセトンを加える。
- チューブをボルテックスして混合する。
- -20℃で60分インキュベートする。
- 13 000 xGで10分遠心する。
- 上清をデカントし、ペレットが乱れないように注意しながら沈殿する。
- チューブの蓋を外し、残ったアセトンを蒸発させる。
- 下流工程で必要なバッファーに再溶解する。