The 21-hydroxylase autoantibody (21-OH Ab) ELISA kit is aimed for professional persons only use, for quantitative of 21-OH Ab in the human serum. 副腎皮質の自己免疫破壊はアジソン病の最も一般的な原因であり、副腎特異的酵素であるステロイド21-ヒドロキシラーゼに対する自己抗体は、副腎自己免疫の重要なマーカーとされています。 8050>
21-OH Ab ELISAキットでは、患者血清、キャリブレーター、コントロール中の21-OH Abを、ELISAプレートのウェルにコートされた21-OHと相互作用させます。 16〜20時間のインキュベーションの後、ウェルにコーティングされた21-OHに結合した21-OH Abを残して検体は廃棄されます。 21-OH-ビオチンは、21-OH Abが2価で作用することにより、プレート上に固定化された21-OHと21-OHビオチンの間に橋が形成される第2インキュベーションステップで添加される。 21-OH-ビオチンの結合量は、ビオチンに特異的に結合するストレプトアビジンペルオキシダーゼ(SA-POD)を添加した第3インキュベーションステップで決定される。 過剰な未結合SA-PODは洗浄され、ペルオキシダーゼ基質3,3′,5,5′-tetramethlybenzidine(TMB)の添加により青色が形成される。 この反応は停止液の添加により停止され、ウェル内容物は黄色に変化する。 黄色の反応混合物の 450nm と 405nm の吸光度を ELISA プレートリーダーで読み取ります。 吸光度が高いほど、検体中の 21-OH Ab が存在することを示します。 405nm で読み取ることにより、高い吸光度を定量することができます。 1 U/ml 未満は 450nm で測定することをお勧めします。 1波長のみでの読み取りが可能な場合は、405nmを使用することができます。 測定間隔は0.3~100U/ml(任意単位)
。