A Fatality Related to Two Novel Hallucinogenic Compounds.Onculus, N-Methyl, N-ethyl, Tryptamine: 4-Methoxyphencyclidineと4-Hydroxy-N-methyl-N-ethyltryptamine

Abstract

今回，4-Methoxyphencyclidine（4-MeO-PCP）によると思われる死亡例の死後濃度分布について報告した． 別の幻覚剤である4-ヒドロキシ-N-メチル-N-エチルトリプタミンも検出されたが、定量はされなかった。 最近「奇妙な」行動をとっていた男性が、密室のベッドで死亡しているのが発見されました。 当初ELISA法でフェンシクリジン（PCP）陽性と判定された毒物検査は、その後ガスクロマトグラフ質量分析法で2種類の幻覚剤を検出し確認されました。 4-MeO-PCPの濃度は、その後、特定の二次検査技術によって定量化された。 末梢血濃度は8.2mg/Lであったのに対し、中心血濃度は14mg/Lであった。 肝臓濃度は120 mg/kg、硝子体濃度は5.1 mg/L、尿は140 mg/L、胃内容物は280 mgを含んでいた。 PCPは検出されなかったが，venlafaxine，olanzapine，lorazepam，hydroxyzineの治療薬濃度が確認された。 死因は急性混合性薬物中毒，死因は事故と認定した。

はじめに

新しい合成精神活性薬の出現とインターネットサイトによる入手は，正式な毒性学的調査の欠如と潜在的な有害性についての懸念を生んだ（1）。 数ある幻覚剤の中で、解離性麻酔薬のフェンシクリジン（PCP）に関連する薬物が最近報告されている（2）。 エチシクリジン、MeO-PCP、3-MeO-PCP、4-methoxyphencyclidine（4-MeO-PCP）はPCPやケタミンと同様の行動作用を示すと考えられています（1, 2）。

4-MeO-PCP（図1）は、例えば、多幸感、共感、肉体からの解離、幻覚などの望ましい効果を持つが、めまい、混乱、精神運動興奮、認知障害などの副作用を伴うことがあると報告されている（2、3）。 さらに、メトキセタミンの急性毒性に類似した毒性症状（著しい頻脈や高血圧など）が、これらのPCPアナログで予想される場合があります（2, 4）。

プシロシンとの構造的類似性に基づく幻覚性化合物の別のグループには、4-アセトキシ-N-メチル-N-エチルトリプタミン（4-アセトキシ-MET）などのトリプタミン類が含まれる。 メタセチンまたは4-AcO-METとしても知られるこの化合物は、O-アセチルプシロシン（4-AcO-DMT）のホモログである。 ヒトでの使用歴はほとんどなく、新規化合物である。 関連性はあるが、あまり知られていないサイケデリック薬物に、4-ヒドロキシ-N-メチル-N-エチルトリプタミン（4-HO-MET）がある。 これは、プシロシンの構造的・機能的アナログであると同時に、メチルエチルトリプタミン（MET）の4-ヒドロキシルアナログでもある。 本報告では、4-MeO-PCPに関連した死亡例において、末梢血、中心血、肝臓、硝子体液、尿、胃内容物における死後濃度を初めて報告するもので、4-MeO-PCPを使用した死亡例では、末梢血、中心血、肝臓、硝子体液、尿、胃内容物における死後濃度を初めて報告する。 確認分析法は既報のものに若干の修正を加えたものである(5)。 834>

方法

症例報告

この54歳の男性（188 cm、128 kg）は統合失調感情抑うつ障害などの精神疾患のため自立生活施設に居住していた。 2014年12月31日朝、施設管理者が行った福祉点検の際、電話に出なかったため心配した母親が発案し、ベッドで無反応の状態で発見された。 救急隊員により、蘇生術を行わず現場で死亡が確認された。 病歴は、高血圧と薬物乱用がありました。 彼はアルコール、マリファナ、覚醒剤、PCPを使用していたことが知られています。 母親によると、彼は長年薬物やアルコールを断っていたが、ある時、インターネットから「3-MeO-PCP」と関連した白い粉を注文したという。 彼の部屋では、細かい結晶状の残留物が入った「#2」と書かれた小さな袋がドレッサーの上で発見されました。 その他の薬物は見つかっていません。 2014年9月20日に異常行動で救急外来を受診した際、職員にうつ病の治療のために『3-MeO-PCP』を服用していることを告白した。 また、服用中に失神エピソードがあったことも認めた

2015年1月1日10時50分、発見から約25時間後に完全解剖が行われ、肺うっ血と浮腫（右840g、左880g）、口と気道に急性薬物中毒に一致する泡が記録されている。 心臓は軽度の肥大（510g）、軽度の心室拡張が見られた。 うっ血性肝脾腫と最小限の肝脂肪症があった。 834>

Postmortem specimen collection

分析したすべての検体はSan Diego County Medical Examiner’s Officeで剖検時に採取されたものである。 末梢血（約20mL）は左総腸骨静脈（脚からの返血で剖検時に骨盤内で目視確認）から採取し、フッ化ナトリウム（100mg）およびシュウ酸カリウム（20mg）を含む標準ガラス管に保存した。 中心血は心臓から直接採取し、同一のチューブに入れた。 肝臓右葉の切片を採取し、防腐剤を含まない不透明なプラスチック製0.118 L容器に保存した。 眼球から硝子体液を注射器で採取し、防腐剤無添加のガラス管に保存した。 尿は0.118Lの不透明なプラスチック容器に採取し、防腐剤なしで保存した。 胃内容物も0.118Lのプラスチック製容器に採取し、防腐剤なしで保存した。 834>

毒物学

包括的な毒物学的スクリーニングレジメンが実施された。 死後の血液は、アルコールと揮発性化合物（GC-炎イオン化検出器ヘッドスペース）、ELISAによる12の乱用薬物パネル（コカイン代謝物、アヘン、メタンフェタミン、ベンゾジアゼピン、カナビノイド、フェンタニル、フェンシクリジン、オキシコドン、メタドン、ゾルピデム、カリソプロドル、ブプレノルフィン；Immunalysis、Inc, Pomona, CA, USA）、固相抽出後のGC-MSによるアルカリ性薬物スクリーニング、アセトニトリルによる検体沈殿後のHPLC-フォトダイオードアレイ検出による酸性/中性薬物スクリーニングが行われた。 また、尿検体についても追加スクリーニング（GC-MS）を実施した。 834>

アルカリ性血液薬物スクリーニング（GC-MS）

この薬物スクリーニング法は、当研究所で7年以上にわたって利用されており、以前に記述した(6)ものである。 簡単に言うと、SPEWare Trace J抽出カートリッジを使用したルーチンの固相抽出技術で構成されています。 2ミリリットルのキャリブレーター、コントロール、ケースワークが、サイクリジン（200 µL、5 µg/mL：内部標準）とアスコルビン酸（200 µL、2%溶液）の添加後に抽出された。 その後、硫酸亜鉛（5 mL、5%メタノール溶液）でサンプルを沈殿させ、酢酸ナトリウムバッファー（4 mL、pH 6.0）で処理した。 SPEカートリッジは、試料添加前にメタノール（3 mL）、脱イオン水（3 mL）および酢酸ナトリウムバッファ（2 mL）で前処理を行った。 サンプルの抽出後、SPEカートリッジを脱イオン水（3 mL）、酢酸（0.1 M; 2 mL）およびメタノール（3 mL）で洗浄した。 カートリッジを3分間乾燥させ、ジクロロメタン/イソプロパノール/14.8M水酸化アンモニウム溶液（78/20/2）で試料を溶出させた。 その後、試料を蒸発させ（30℃、窒素気流下）、酢酸エチル（150 µL）で再沈殿させた。 各抽出液の1マイクロリットル（スプリットレス）をGC-MSシステムに注入し、アルカリ性薬物の分離・同定を行った。 15 m、直径0.25 mm、膜厚0.25 μmの分析用カラム（Phenomenex Zebron、ZB-5MS）を使用し、キャリアガスとしてヘリウムを用いた（1.1 mL/min）。 ガスクロマトグラフ（Agilent Technologies, 7890A, Santa Clara, CA, USA）の入口温度は250℃、オーブン温度は初期85℃、170℃まで40℃/分でランプアップ（4分保持）、その後190℃まで40℃/分（5分保持）、最後に300℃まで10℃/分（7分保持）した。 MS Auxは280℃であった。 質量選択検出器 (Agilent Technologies, 5975C) はスキャンモードに設定し、溶媒遅延は 2.64 min としました。 ピークの同定は、相対保持時間（内部標準との相対値：RRT）、そして市販のMSライブラリおよび/またはSWGDRUGマススペクトルライブラリ（http://www.swgdrug.org；少なくとも70％一致）からのマススペクトル一致により決定しました。

4-MeO-PCP 確認分析

材料

すべての溶媒および化学物質はFisher Scientific（Pittsburgh, PA, USA）から購入し、分析グレードかそれ以上を使用しました。 ホウケイ酸ガラス試験管は、抽出のすべての段階で使用された（VWR International, Radnor, PA, USA）。 834>

抽出

4-MeO-PCPは、窒素リン検出器（NPD）（5）と組み合わせたGCを使用して、基本薬物用に以前に説明した手順を若干変更することで確認および定量化されました。 分析対象は、全血（豚）校正物質（0.10, 0.25, 0.50, 0.75, 1.0, 2.0 mg/L）、肝臓ホモジネート（豚）校正物質（0.25, 0.50, 0.75, 1.0, 2.0, 3.0 mg/kg）、ケース試料（全血、肝臓、尿、ガラス、胃）および陽性・陰性対照で、アルカリ液体/液体抽出法に供しました。 校正物質、対照物質および症例試料1 mLに脱イオン水（5 mL）を加え、ボルテックスした。 次に、作業用内部標準物質（100 µL PCP, 10 mg/L）を添加し、ボルテックスした。 サンプルは、濃縮水酸化アンモニウム（1 mL）を加えてアルカリ性にした後、再びボルテックスした。 1-クロロブタン（6 mL）を加え、チューブにキャップをかけ、機械式ロッカーで30分間混合した。 エマルジョン抑制のため、各チューブに硫酸ナトリウム約200 mgを加え、さらに2400 gで5分間遠心分離し、上層有機物を新しい試験管に移した。 約1.0 N 塩酸 (3.5 mL) を加え、30 分間攪拌した。 その後、試験管を2,400 gで5分間遠心分離し、上層の有機物を廃液とした。 残りの水性部分を濃水酸化アンモニウム(1 mL)でアルカリ性にし、ボルテックスで処理した。 1-クロロブタン (3 mL) を加え、再び30分間チューブを混合した。 その後、2,400 gで5分間遠心分離し、上層の有機物を新しい試験管に移した。 有機層を窒素気流下、30℃で乾燥させた。 サンプルはメタノール(100 µL)で再構成してからオートサンプラーバイアルに移し、GC-NPDで分析した

Chromatographic conditions

分析では以下のGC-NPD条件を使用しました。 キャピラリーカラム (DB-17, 15 m, 0.25 i.d., 0.25 µm; Phenomenex, Torrance, CA, USA) を装備したGC (7890A; Agilent Technologies) に試料 (1 µL) を分割せずに注入し ました。 インジェクター温度は250℃、検出器は280℃に設定しました。 初期オーブン温度は50℃で、35℃/分で275℃まで昇温し、7分間保持した。 注入後の総実行時間は13.5分であった。 キャリアガスには水素を用い、2 mL/min の一定速度で注入した。 PCPの保持時間は5.2分、4-MeO-PCPの保持時間は6.0分でした。

バリデーション

検出限界は0.05 mg/L、最小校正濃度から求めた定量限界は全血が0.10 mg/L、肝臓が0.25 mg/kgでした。 全血で0.50 mg/Lと1.5 mg/Lに独立に調製した対照試料では，それぞれ0.47 ± 0.03 mg/L（平均±標準偏差，N = 4）および1.28 ± 0.06 mg/L（平均±標準偏差，N = 4）を測定しました。 マトリックス効果は、水および肝臓ホモジネートで調製した比較対照試料（0.5 および 1.5 mg/L）の抽出および分析によって評価された。 水では 0.47 ± 0.02 mg/L （平均 ± 標準偏差；N = 3）および 1.34 ± 0.18 mg/L （平均 ± 標準偏差；N = 5）、肝臓ホモジネートでは 0.45 ± 0.06 mg/kg （平均 ± 標準偏差；N = 4）および 1.47 ± 0.11 mg/kg（ 平均 ± 標準偏差；N = 4）のレベルが決定された。 834>

結果と考察

4-MeO-PCP は PCP の ELISA スクリーニングによって初めて検出されました。 5.0ng/mLのPCPを基準として当施設で確立したスクリーニングでは、陰性試料（100％結合）に対して41％の結合率で陽性となった。 今回の症例では、中心血の結合率は2％であり、明らかに陽性であった。 PCPはルーチンの確認法では検出されなかった。 PCP（GC-MS選択的イオンモニタリング法）の検出限界および定量限界はそれぞれ2.0および5.0 ng/mLであった。 その後，GC-MSアルカリスクリーニング法（6）を用いて固相抽出を行い，SWGDRUG質量スペクトルライブラリ（http://www.swgdrug.org）から末梢血中に4-MeO-PCPが推定的に同定された（図2）。 抽出後，純ストックのマススペクトルスキャンを10.4分（RRT = 1.25；内部標準シクリジンと比較）で行い，121，189，230，272および147の有意なイオンが確認されました（図3）。

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