Doelstelling: Ons doel was om de bijdrage van 6′,7′-dihydroxybergamottin (DHB) aan het remmende effect van grapefruitsap ten opzichte van intestinale cytochroom P450 (CYP) 3A4 te beoordelen.
Methoden: Een waterig extract werd bereid uit grapefruitsap door centrifugatie, filtratie, en herhaaldelijk wassen van het deeltje met water. De concentraties van verschillende furanocoumarines in dit grapefruitsap “serum” en in volledig grapefruitsap werden gemeten door HPLC en hun identiteit werd bevestigd door vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie. Vijf gezonde vrijwilligers kregen een enkele tablet felodipine (10 mg) met grapefruitsap, sinaasappelsap-bevattend serum, of gewoon sinaasappelsap (controle). De farmacokinetische uitkomsten van felodipine werden geëvalueerd met behulp van niet-compartimentele methoden. De effecten van serum en gezuiverd DHB (in dezelfde concentraties als gemeten in het sinaasappelsap-bevattend serum gebruikt in de klinische studie) werden, in vitro, vergeleken met betrekking tot (1) de omkeerbare en mechanisme-gebaseerde remming van de katalytische activiteit van complementair desoxyribonucleïnezuur-geëxpresseerd CYP3A4 en (2) het tijdsafhankelijke verlies van immunoreactief CYP3A4-eiwit in gemodificeerde Caco-2-cellen.
Resultaten: De concentratie van DHB in serum was vergelijkbaar met die gemeten in heel grapefruitsap (38 micromol/L versus 43 micromol/L), en de concentraties van andere bekende furanocoumarines lagen ruim onder de laagste gepubliceerde concentratie die nodig is om de katalytische activiteit met 50% te remmen. In vergelijking met gewoon sinaasappelsap deed sinaasappelsap bevattend serum de mediane oppervlakte onder de plasmaconcentratie-tijdcurve voor felodipine met een factor 1,9 toenemen (P =.04) en de maximale concentratie met een factor 1,7 (P =.01). In vitro hadden serum en gezuiverd DHB vergelijkbare remmende effecten op de CYP3A4 activiteit met betrekking tot zowel reversibele remming (95% betrouwbaarheidsinterval, 85% +/- 5,7% en 75% +/- 4,5%, respectievelijk) als mechanisme-gebaseerde remming na een preïncubatie van 15 minuten (95% betrouwbaarheidsinterval, 79% +/- 6,8% en 78% +/- 5,7%, respectievelijk). In Caco-2 cellen was het tijdgemiddelde van het CYP3A4 eiwitverlies veroorzaakt door serum en gezuiverd DHB identiek (43%).
Conclusie: De interactie tussen grapefruitsap serum en felodipine kan grotendeels worden toegeschreven aan DHB. Dit stelt vast dat DHB een belangrijke bijdrage levert aan het effect van grapefruitsap.