2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin en Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Abstract :
3D8 single chain variable fragment (scFv) is een recombinant antilichaam. 3D8 scFv bestaat uit variabele zware keten domeinen (VH) en variabele lichte keten domeinen (VL) die met elkaar verbonden zijn door flexibele peptide linker. 3D8 scFv werd geïsoleerd uit auto-immuungevoelige MRL-lpr/lpr-muizen. Het heeft DNase- en RNase-activiteiten zonder significante sequentiespecificiteit. Het internaliseert door caveola-gemedieerde endocytose en wordt geaccumuleerd in het cytosol. In eerdere studies toonde WT 3D8 scFv de antivirale effecten tegen pseudorabiesvirus (PRV) en herpes simplex virus type-1 (HSV-1). Net als WT 3D8 scFv, kon 3D8 VL DNA en RNA substraten hydrolyseren en het dringt ook door in het cytoplasma. In deze studie heb ik vergeleken het DNA en RNA hydrolyserende activiteit tussen 3D8 VL en WT 3D8 scFv. Ik mat de stabiliteit van 3D8 VL in een verscheidenheid van pH-bereiken en temperaturen door FRET (Fluorescentie resonantie energieoverdracht) assay te gebruiken. Ik bevestigde ook de celpenetratie activiteit in cytoplasma door het celmembraan en ik aangetoond dat 3D8 VL heeft geen cytotoxisch effect tegen gastheercel aangetoond door WT 3D8 scFv (in vitro). 3D8 VL eiwit werd gedetecteerd in verschillende organen (lever, long en hersenen) en bloed, toen ik het eiwit geïnjecteerd bij de muis door intra-peritoneale injectie. Met behulp van in vivo beeldvorming, heb ik bevestigd dat 3D8 scFv en VL kon worden geabsorbeerd in het bloed en vervolgens doorgegeven aan het hele lichaam en uiteindelijk bereikten ze verschillende organen. De resultaten geven aan dat 3D8 VL heeft soortgelijke biochemische en biologische eigenschappen met WT 3D8 scFv. Samengenomen, kan 3D8 VL WT 3D8 scFv voor een krachtig antiviraal eiwit vervangen.
Biografie :
Yongjun Lee heeft zijn Master’s degree behaald aan de Sungkyunkwan University. Zijn onderzoeksinteresse gaat uit naar antivirale proteïnen (3D8 scFv proteïne) met behulp van E. coli expressiesystemen en het proteïnetransport door bloed-hersenbarrières.