Poliovirus (PV)-geïnfecteerde cellen ondergaan uitgebreide proliferatie en herschikking van intracellulaire gladde membranen om blaasjes te genereren waarop virale RNA-replicatie optreedt. Van PV-eiwitten 2C en 2BC is bekend dat ze nauw geassocieerd zijn met deze membraneuze replicatiecomplexen en er is voorgesteld dat ze betrokken zijn bij de vorming van deze virus-geïnduceerde blaasjes. Wij hebben deze eiwitten, en eiwitten met mutaties in de vermoedelijke nucleotide (NTP) bindingsmotieven, tot expressie gebracht in menselijke cellen met behulp van recombinant vaccinia virussen en T7 RNA polymerase-gestuurde transcriptie. Om de subcellulaire lokalisatie-eigenschappen van deze eiwitten vast te stellen in afwezigheid van andere PV-eiwitten en om te bepalen of zij ultrastructurele veranderingen induceren, werden cellen die 2C- en 2BC-eiwitten tot expressie brengen onderzocht met behulp van immunofluorescentiemicroscopie (IF), elektronenmicroscopie (EM), en immuno-EM (IEM). Het cytoplasma van cellen die 2C of 2BC tot expressie brachten vertoonde blaasjes van 50-350 nm in diameter, die leken op die gevonden in PV-geïnfecteerde cellen. Zowel 2C als 2BC waren met deze blaasjes geassocieerd. Mutaties in het vermoedelijke NTP-bindingsmotief hadden geen invloed op de blaasjesinductie door 2C of 2BC. Ondanks de membraanreorganisatie en de vorming van blaasjes geïnduceerd door 2C en 2BC proteïnen, werd geen verhoogde synthese van lipide waargenomen. Guanidine hydrochloride bij een concentratie die de replicatie van PV remt, had geen significante effecten op de IF-patronen van 2C of 2BC. Een andere opvallende verandering in cellen die 2C tot expressie brengen, maar niet 2BC, was de vorming van uitgebreide buisvormige membraanstructuren met een myeline-achtige ordening in het lumen van het ruwe endoplasmatische reticulum. IEM analyses toonden aan dat 2C geassocieerd was met deze structuren. In aanwezigheid van andere PV-eiwitten werden de door 2C geïnduceerde buisvormige membraanstructuren niet waargenomen. Deze structuren worden niet waargenomen in poliovirus-geïnfecteerde cellen, maar wijzen waarschijnlijk op een nieuwe eigenschap van 2C die een complexe interactie met intracellulaire membranen induceert.