2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin and Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Postery & Accepted Abstracts: Appli Micro
Abstract :
3D8 single chain variable fragment (scFv) is recombinant antibody. 3D8 scFv składa się ze zmiennych domen łańcucha ciężkiego (VH) i zmiennych domen łańcucha lekkiego (VL), które są połączone elastycznym łącznikiem peptydowym. 3D8 scFv zostało wyizolowane z podatnej na autoagresję myszy MRL-lpr/lpr. Posiada aktywność DNazy i RNazy bez znaczącej specyficzności sekwencji. Internalizuje się przez endocytozę z udziałem jaskiń i jest gromadzona w cytozolu. W poprzednich badaniach WT 3D8 scFv wykazywała działanie przeciwwirusowe wobec wirusa pseudorabies (PRV) i wirusa herpes simplex typu 1 (HSV-1). Podobnie jak WT 3D8 scFv, 3D8 VL może hydrolizować substraty DNA i RNA, a także przenikać do cytoplazmy. W tym badaniu porównałam aktywność hydrolizującą DNA i RNA pomiędzy 3D8 VL i WT 3D8 scFv. Zmierzyłam stabilność 3D8 VL w różnych zakresach pH i temperaturach za pomocą testu FRET (Fluorescence resonance energy transfer). Potwierdziłem również aktywność penetracji komórek do cytoplazmy przez błonę komórkową i wykazałem, że 3D8 VL nie ma efektu cytotoksycznego wobec komórek gospodarza wykazanego przez WT 3D8 scFv (in vitro). Białko 3D8 VL zostało wykryte w kilku organach (wątroba, płuca i mózg) oraz we krwi, kiedy wstrzyknąłem białko myszom poprzez iniekcję dootrzewnową. Używając obrazowania in vivo, potwierdziłam, że 3D8 scFv i VL mogły być wchłonięte do krwi, a następnie krążyły w całym organizmie i w końcu dotarły do kilku narządów. Wyniki wskazują, że 3D8 VL ma podobne właściwości biochemiczne i biologiczne jak WT 3D8 scFv. Podsumowując, 3D8 VL może zastąpić WT 3D8 scFv jako silne białko przeciwwirusowe.
Biografia :
Yongjun Lee otrzymał tytuł magistra na Uniwersytecie Sungkyunkwan. Jego zainteresowania badawcze dotyczą białek przeciwwirusowych (3D8 scFv) przy użyciu systemów ekspresji E. coli i transportu białek przez bariery krew-mózg.