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Característica de um preparado de acetona em pó dependente de vitamina K γ-glutamil carboxilase

Posted on Outubro 30, 2021 by admin

Uma acetona em pó, preparada a partir dos microsomas hepáticos de ratos dependentes de vitamina K, retém uma vitamina activa dependente de vitamina K γ-glutamil carboxilase. Enquanto os requisitos básicos da enzima são semelhantes aos da carboxilase dos micrótomos ressuspensos ou dos micrótomos solubilizados com detergente, a preparação de acetona em pó revela algumas propriedades adicionais da carboxilase. A carboxilação do substrato sintético do pentapéptido fenilalanil-leucil-glutamil-glutamil-valina pode ocorrer na ausência de detergente não iônico; entretanto, quando a hidroquinona de vitamina K aciona a carboxilação da acetona em pó, o detergente não iônico em pó é necessário para a máxima atividade. São descritas experiências nas quais a acetona em pó é incubada com o pentapéptido, granulada por centrifugação, ressuspendida com reagentes frescos, e incubada novamente. Eles sugerem que o baixo V para a carboxilase, observado por todos os investigadores, não é, pelo menos em parte, o resultado de inativação enzimática irreversível ou esgotamento dos reagentes, mas sim a acumulação de um inibidor ou inibidores ainda não identificados. O pó de acetona preparado a partir de microssomas derivados de fígados de vacas nutricionalmente normais contém vitamina K dependente de γ-glutamil carboxilase. Esta enzima pode ser solubilizada a partir do pó usando Triton X-100 e pode fornecer um grande suprimento de material de base para a purificação enzimática.

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