2ª CONFERÊNCIA INTERNACIONAL SOBRE MICROBIOLOGIA APLICADA E MICROBOS BENÉFICOS
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPÃO
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin e Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Posters &Abstracts aceites: Appli Micro
Resumo :
3D8 fragmento variável de cadeia única (scFv) é um anticorpo recombinante. 3D8 scFv consiste de domínios variáveis de cadeia pesada (VH) e domínios variáveis de cadeia leve (VL) que se ligam por um ligador de peptídeo flexível. O 3D8 scFv foi isolado do rato MRL-lpr/lpr de propensão auto-imune. Possui actividades DNase e RNase sem especificidade de sequência significativa. Internaliza-se por endocitose caveolaemediada e é acumulada no citosol. Em estudos anteriores, o WT 3D8 scFv mostrou os efeitos antivirais contra o vírus dos pseudorabetos (PRV) e o vírus do herpes simplex tipo 1 (HSV-1). Assim como o WT 3D8 scFv, o 3D8 VL poderia hidrolisar substratos de DNA e RNA e também penetrar no citoplasma. Neste estudo, comparei a atividade de hidrolisação de DNA e RNA entre o 3D8 VL e o WT 3D8 scFv. Eu medi a estabilidade do 3D8 VL em uma variedade de faixas de pH e temperaturas usando o ensaio FRET (Fluorescência de transferência de energia por ressonância). Também confirmei a atividade de penetração celular no citoplasma através da membrana celular e demonstrei que o 3D8 VL não tem efeito citotóxico contra a célula hospedeira mostrada pelo WT 3D8 scFv (in vitro). A proteína 3D8 VL foi detectada em vários órgãos (fígado, pulmão e cérebro) e sangue, quando injetei a proteína em camundongos através de injeção intra-peritoneal. Usando imagens in vivo, confirmei que a proteína 3D8 scFv e VL podia ser absorvida pelo sangue e depois circulada para todo o corpo e finalmente chegava a vários órgãos. Os resultados indicam que o 3D8 VL tem propriedades bioquímicas e biológicas semelhantes com o WT 3D8 scFv. Em conjunto, o 3D8 VL pode ser substituído pelo WT 3D8 scFv por uma potente proteína antiviral.
Biografia :
Yongjun Lee recebeu o seu mestrado da Universidade Sungkyunkwan. Seu interesse de pesquisa é sobre a proteína antiviral (proteína 3D8 scFv) usando sistemas de expressão de E. coli e o transporte de proteínas através das barreiras cerebrais do sangue.