O desenvolvimento de 181 embriões humanos excedentes, incluindo tanto normais como anormalmente fertilizados, foi observado do 2º ao 5º dia, 6º ou 7º dia in vitro. 63/149 (42%) embriões normalmente fertilizados atingiram o estágio blastocisto no dia 5 ou 6. Os números de células totais, tefctoderma (TE) e massa celular interna (MCI) foram analisados através de rotulagem diferencial dos núcleos com fluorocromos específicos de polinucleotídeos. Os núcleos TE foram rotulados com um fluorocromo durante a lise imuno-cirúrgica, antes de fixar o embrião e rotular ambos os conjuntos de núcleos com um segundo fluorocromo (Handyside e Hunter, 1984, 1986). Os blastocistos recém expandidos normalmente fertilizados no dia 5 tinham um total de 58,3 +/- 8,1 células, que aumentaram para 84,4 +/- 5,7 e 125,5 +/- 19 nos dias 6 e 7, respectivamente. Os números de células TE foram semelhantes nos dias 5 e 6 (37,9 +/- 6,0 e 40,3 +/- 5,0, respectivamente) e depois duplicaram no dia 7 (80,6 +/- 15,2). Em contraste, o número de células MI dobrou entre os dias 5 e 6 (20,4 +/- 4,0 e 41,9 +/- 5,0, respectivamente) e permaneceu praticamente inalterado no dia 7 (45,6 +/- 10,2). Houve morte celular generalizada tanto no TE quanto na MCI, como evidenciado pela fragmentação dos núcleos, que aumentou substancialmente no 7º dia. Estes resultados são comparados com o número de células em blastocistos morfologicamente anormais e blastocistos derivados de embriões fertilizados anormalmente. Os núcleos de embriões aprisionados também foram examinados. O número de células TE e ICM alocadas em blastocistos normalmente fertilizados parece ser semelhante aos números alocados no rato. Ao contrário do rato, no entanto, a proporção de células MI permanece maior, apesar da morte das células em ambas as linhagens.