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Vírus adeno-associados serotipados com AAV8 capsid são mais eficientes do que os serotipos AAV-1 ou -2 serótipos para o parto do cérebro neonatal de camundongos em larga escala

Posted on Outubro 14, 2021 by admin

Vírus Adeno-associado (AAV) ganharam uma posição preeminente no campo do parto do gene para o cérebro normal através de sua capacidade de alcançar extensa transdução de neurônios e de mediar a expressão gênica a longo prazo, sem toxicidade aparente. Em animais adultos, a infusão direta de vetores AAV no parênquima cerebral resulta em uma transdução altamente eficiente das estruturas-alvo. Entretanto, o fornecimento global mediado por AAV ao cérebro adulto tem sido um objetivo elusivo. Em contraste, o fornecimento global generalizado de genes tem sido obtido pela injeção de AAV1 ou AAV2 em recém-nascidos. Entre os novos serotipos de AAV clonados e projetados para a produção de vetores recombinantes, o AAV8 mostrou um tremendo potencial para o fornecimento de genes in vivo com transdução quase completa de muitos tecidos em roedores após a infusão intravascular. Aqui comparamos a eficiência de um vetor serotipado AAV8 com a dos vetores serotipados AAV1 e AAV2 para a extensão do parto do gene para o cérebro após a injeção neonatal nos ventrículos laterais. Todos os vetores codificados com proteína fluorescente verde (GFP) sob o controle de um promotor híbrido CMV enhancer/chicken beta-actin com repetições terminais invertidas AAV2, mas diferem uns dos outros no que diz respeito ao tipo capsid. Um total de 6,8 x 10(10) cópias do genoma foram injetadas nos ventrículos laterais dos ratos do dia 0 pós-natal. Camundongos foram mortos no 30º dia pós-natal e cérebros analisados para distribuição de células GFP-positivas. O AAV8 mostrou-se mais eficiente que os vetores AAV1 ou AAV2 para entrega de genes a todas as estruturas analisadas, incluindo o córtex cerebral, hipocampo, bulbo olfativo e cerebelo. Além disso, a intensidade da expressão gênica, avaliada através de um leitor de microarranjo, foi consideravelmente maior para o AAV8 em todas as estruturas analisadas. Em conclusão, a melhor transdução obtida pelo AAV8 em comparação com AAV1 e AAV2 indica que o AAV8 é o sorotipo superior para a entrega do gene ao SNC.

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