Acanthopanacis Senticosi Radix et Rhizoma seu Caulis, cunoscut în mod obișnuit sub numele de ginseng siberian sau Ciwujia în chineză, este rădăcina uscată și rizomul sau tulpina de Acanthopanax senticosus (clasificat anterior ca Eleutherococcus senticosus). Conform farmacopeei chineze, este un medicament tradițional chinezesc prescris pe scară largă pentru a hrăni qi-ul, a fortifica splina, a tonifia rinichii și a liniști mintea . Este, de asemenea, un aliment funcțional renumit pentru activitățile sale anti-fatiga, neuroprotectoare și imunomodulatoare. În această trecere în revistă, se va discuta acțiunea imunomodulatoare și componentele active corespunzătoare ale Ciwujia. Mai mult, s-a încercat să se compare puterea extractului apos cu cea a extractului de etanol în reglarea producției de citokine din celulele mononucleare din sângele periferic uman, astfel încât să se ofere mai multe informații despre modul în care Ciwujia ar trebui preparată pentru a beneficia de proprietățile sale imunomodulatoare.
Efectul imunomodulator al Ciwujia a fost dovedit clinic în anii 1980. Un studiu dublu-orb, controlat cu placebo, efectuat de Bohn și colegii săi, a demonstrat că preparatul de Ciwujia cu etanol a provocat o creștere drastică a numărului absolut de celule imunocompetente, cu un efect deosebit de pronunțat asupra limfocitelor T, predominant de tip helper/ inductor, și, de asemenea, asupra celulelor citotoxice și natural killer ale voluntarilor sănătoși . Ulterior, au fost efectuate o serie de lucrări de cercetare științifică pentru a elucida acțiunea sa în mai multe detalii.
Extract apos și extract de etanol
Atât extractul apos cât și extractul de etanol de Ciwujia au fost raportate pentru efectele lor imunologice.
Administrarea orală a extractelor apoase de mostre de Ciwujia din cinci surse diferite la 1 g/kg greutate corporală timp de 9 zile consecutive ar putea prelungi semnificativ timpul de înot al șoarecilor masculi C57 BL/6J. Unele dintre extractele apoase au inhibat reducerea activității natural killer (NK) la șoarecii stresați prin înot forțat . Rezultatul efectului de stimulare a NK a fost în concordanță cu cel raportat de echipa lui Yoon . Administrarea intravenoasă de GF100 (o perfuzie apoasă de Ciwujia) a sporit semnificativ citotoxicitatea NK a șoarecilor BALB/c față de celulele de limfom cu celule T murine Yac-1. Pe de altă parte, GF100 a inhibat semnificativ metastaza pulmonară a celulelor de colon 26-M3.1 într-o manieră dependentă de doză și acest efect a fost complet abolit dacă celulele NK au fost epuizate prin injectarea de ser de iepure anti-asialo GM1. În afară de celulele NK, splenocitele și macrofagele au fost, de asemenea, ținte imunologice ale GF100. Tratamentul cu GF100 a sporit în mod dependent de doză proliferarea splenocitelor stimulate cu concanavalină A (Con A). Mai mult decât atât, tratamentul macrofagelor peritoneale cu GF100 într-un experiment in vitro a indus producția de diverse citokine, cum ar fi IL-1β, TNF-α, IL-12 și IFN-γ, într-o manieră dependentă de doză. În plus, macrofagele peritoneale obținute de la șoarecii tratați cu GF100 au prezentat o activitate citolitică mai mare împotriva celulelor tumorale decât cele provenite de la șoarecii netratați. Prin urmare, s-a concluzionat că efectul antitumoral al GF100 a fost asociat cu activarea macrofagelor și a celulelor NK . Wang și colegii săi au raportat, de asemenea, că un preparat apos de Ciwujia ar putea crește semnificativ funcția fagocitară a monocitelor la șoareci .
Extractul de etanol de Ciwujia a exercitat, de asemenea, o activitate imunomodulatoare. S-a constatat că un preparat farmaceutic de etanol de Ciwujia a influențat în mod marcat sinteza chemokinelor și citokinelor din culturile de sânge integral activat ale voluntarilor sănătoși. Acesta a crescut eliberarea de Rantes, dar a scăzut producția de IL-4, IL-5 și IL-12. În funcție de concentrația utilizată, efectul său asupra G-CSF, IL-6 și IL-13 ar putea fi fie stimulativ, fie inhibitor. Un alt extract de etanol apos de 40% (AE) a fost raportat ca fiind capabil să contracareze efectul toxic al cadmiului care a indus modificări în mecanismele de imunoreglare ale unei gazde. Administrarea orală de AE timp de 8 săptămâni a dus la o scădere semnificativă a nivelului de cadmiu și a crescut cantitatea de macrofage și de limfocite B și T în splina șoarecilor intoxicați cu clorură de cadmiu .
Polizaharide și glicoproteine
Polizaharidele și glicoproteinele sunt două fracțiuni imunomodulatoare active din Ciwujia.
Polizaharidele de Ciwujia (PES), atunci când au fost injectate intraperitoneal la 100 mg/kg timp de 4-6 zile consecutive, ar putea crește semnificativ numărul de celule formatoare de plăci de anticorpi IgM la șoarecii provocați cu globule roșii de oaie și, de asemenea, a crescut semnificativ anticorpii anti-BSA și a îmbunătățit considerabil fagocitoza macrofagelor peritoneale . De asemenea, PES însuși a prezentat o puternică activitate mitogenică asupra celulelor splinei de șoarece într-o manieră dependentă de doză și ar putea crește activitatea stimulatoare a lipopolizaharidei (LPS) asupra transformărilor limfocitelor .
Mai recent, echipa lui Han a investigat mecanismul acțiunii imunomodulatoare a unei fracțiuni polizaharidice izolate dintr-o cultură celulară de A. senticosus (ASP) folosind teste in vitro . Ei au constatat că ASP a crescut proliferarea celulelor B și a crescut producția de anticorpi policlonali IgM a celulelor B în funcție de doză. Mai mult decât atât, ASP a stimulat macrofagele peritoneale murine, după cum reiese din creșterea expresiilor ARNm și proteice ale unor citokine precum IL-1β, IL-6 și TNF-α. În plus, ASP a crescut expresia genei oxidului nitric sintetazei inductibile (iNOS) și producția de NO. Pe baza constatării faptului că activitățile ASP asupra celulelor B și a macrofagelor au fost reduse semnificativ prin tratarea celulelor cu anticorpi împotriva receptorilor Toll-like (TLR)-4 și TLR-2 înainte de ASP, s-a concluzionat că ASP activează celulele B și macrofagele prin intermediul căii de semnalizare TLR. Cu toate acestea, s-a demonstrat că ASP nu a activat celulele T.
Polizaharidele de Acanthopanax senticosus acționează nu numai în sisteme in vitro sau pe rozătoare normale, ci și pe animale imunocompromise/imunologic contestate. S-a raportat că o fracțiune acidă de polizaharide crește indicii timusului și splinei, crește numărul de leucocite din sângele periferic, îmbunătățește funcția fagocitară a macrofagelor, crește TNF-α, IFN-γ și nivelul hemolizinei serice, îmbunătățește proliferarea splenocitară și scade rata de apoptoză a limfocitelor splenice la șoarecii imunodeprimați indusă de ciclofosfamidă . În China, A. senticosus este utilizat în mod obișnuit ca supliment alimentar de către medicii veterinari pentru a promova sănătatea animalelor. Acesta ar putea spori răspunsurile imune celulare și umorale ale purceilor înțărcați prin reglarea producției de limfocite, citokine și anticorpi . Pe de altă parte, polizaharidul dietetic A. senticosus (ASPS) a modulat eliberarea de citokine pro-inflamatorii în timpul provocării imunologice. Aceasta a diminuat creșterea nivelurilor plasmatice și a expresiilor ARNm din splină ale IL-1β, IL-6 și TNF-α induse de provocarea cu LPS la purcei .
GF-AS a fost un strat de proteină solubilă fracționată din scoarța de tulpină de A. senticosus. Acesta a indus producția de citokine a macrofagelor peritoneale și a exercitat un efect profilactic împotriva metastazelor pulmonare induse de celulele tumorale colon26-M3.1 prin activarea celulelor NK la șoareci. Cu ajutorul cromatografiei pe gel și al testului de proliferare a splenocitelor, a fost izolată și identificată ca fiind componenta activă o glicoproteină numită EN-SP. EN-SP avea aproximativ 30,5 kDa și era compusă în principal din carbohidrați. Aceasta ar putea crește în mod semnificativ proliferarea celulară a splenocitelor murine fără stimuli mitogeni și a posedat o activitate antimetastatică mai puternică decât GF-AS .
Molecule mici
Pe lângă polizaharide și glicoproteine, unele molecule mici prezente în Ciwujia capătă, de asemenea, o anumită atenție pentru abilitățile lor de reglare a sistemului imunitar.
Isofraxidina
Isofraxidina, un compus cumarinic activ utilizat pentru a autentifica plantele brute sau produsele comerciale Ciwujia , exercită un spectru larg de efecte farmacologice în diferite boli, cum ar fi osteoartrita , cancerul , tulburarea metabolismului lipidic și boala Alzheimer .
În aspectul imunomodulator, izofraxidina exercită în principal o activitate antiinflamatoare. Efectul său profund în ameliorarea edemului și a durerii a fost mediat prin inhibarea producției induse de LPS a citokinelor proinflamatorii, inclusiv TNF-α și a moleculelor de semnalizare a proteinei kinazei activate de mitogenul fosforilat (MAPK) p38 și ERK1/2, din macrofage . Isofraxidina a suprimat, de asemenea, expresia proteică a NF-κB, nivelurile de NO și IL-6 în ser și producția de TNF-α în ficatul șoarecilor provocați de LPS . Mai mult, a protejat șoarecii împotriva leziunilor pulmonare acute prin inhibarea expresiei proteice a ciclooxigenazei-2 (COX-2) și prin reducerea infiltrației celulelor inflamatorii în țesuturile pulmonare . După cum s-a demonstrat la condrocitele izolate de la pacienți cu osteoartrită, pretratarea cu izofraxidină înainte de IL-1β ar putea inhiba expresia stimulată de IL-1β a iNOS și COX-2 care, la rândul lor, au blocat producția de oxid nitric (NO) și de prostaglandină E2 (PGE2). În plus, izofraxidina a inhibat în mod remarcabil nivelurile de ARNm și secreția de metaloproteinaze matriciale (MMP). S-a concluzionat că izofraxidina a inhibat inflamația articulară indusă de IL-1β prin intermediul reglării semnalizării NF-κB .
Siringina (Eleutherosida B)
Siringina, denumită și eleutherosida B, aparține grupului de compuși chimici lignan. Este markerul chimic enumerat în ediția din 2015 a Farmacopeei Republicii Populare Chineze (CP 2015) pentru testarea Ciwujia. După cum se stipulează, probele uscate de Ciwujia trebuie să conțină nu mai puțin de 0,05% în greutate de siringină . Siringina este unul dintre principalii compuși activi din Ciwujia și despre care s-a raportat că posedă activități antidiabetice, antifatiga, de potențare a somnului, neuroprotectoare, precum și antioxidante.
Siringina descrie un efect imunomodulator mai degrabă decât imunostimulator. Aceasta a inhibat imunohemoliza in vitro a eritrocitelor de oaie acoperite cu anticorpi, indusă de serul de cobai, prin suprimarea C3-convertazei din calea complementului clasic . În afară de imunitatea umorală, imunitatea celulară este, de asemenea, implicată în răspunsul imunologic declanșat de seringină. Siringina a inhibat în mod semnificativ atât producția de TNF-α din celulele macrofage murine RAW 264.7 stimulate de LPS, cât și proliferarea celulelor T citotoxice, într-o manieră dependentă de doză. Recent, Ahmad și colegii săi au demonstrat în continuare că siringina a redus puternic chemotaxia, activitatea fagocitară, producția de ROS și NO și secrețiile de IL-1β, TNF-α, IL-6, PGE2 și MCP-1 ale celulelor RAW 264.7 activate. Odată cu observarea faptului că siringina a suprimat în mod semnificativ edemul urechii indus de fluoresceină-izotiocinat (FITC, un hapten care este capabil să declanșeze reacții alergice) la șoareci, dar nu și edemul urechii indus de uleiul de croton sau de acidul arahidonic, s-a speculat că siringina a prezentat un efect antialergic, dar nu și un efect antiinflamator.
Eleutheroside E
Eleutheroside E este un alt lignan izolat din Ciwujia. Aceasta ar putea atenua disfuncția cognitivă indusă de anestezic la animalele îmbătrânite și ar putea ameliora diabetul prin creșterea absorbției de glucoză, îmbunătățirea rezistenței la insulină și reglarea metabolismului glucozei la șoarecii diabetici de tip 2 . Utilizând fracționarea ghidată de bioactivitate, s-a constatat, de asemenea, că este constituentul activ al Ciwujia pentru combaterea oboselii .
Eleutherosida E a prezentat un efect imunomodulator și a acționat împotriva artritei induse de colagen (CIA) prin suprimarea eliberării de citokine inflamatorii. Șoarecii CIA tratați cu eleuterosid E au prezentat niveluri serice semnificativ mai mici de TNF-α, IL-6 și IL-23 decât cei de la șoarecii tratați cu vehicul. Efectul său imunomodulator a fost confirmat în continuare în macrofagele cultivate, ale căror producții de TNF-α și IL-6 au fost profund suprimate în mod dependent de doză și de timp. După cum au raportat Kimura și Sumiyoshi, două din cele cinci extracte apoase de Ciwujia testate au putut recupera reducerea activității NK la șoarecii stresați prin înot forțat. Analiza HPLC a arătat că aceste două extracte conțineau cea mai mare cantitate de eleuterozidă E. Prin urmare, s-a speculat că eleuterozida E era componenta imunostimulatoare activă din extractul de Ciwujia .
.