Niveluri plasmatice crescute de 8-hidroxi-2′-deoxigozganozină (8-OHdG) la pacienții cu glaucom de pseudoexfoliere

Abstract

Scop. Pentru a investiga leziunile ADN induse de stresul oxidativ sistemic la pacienții cu glaucom de pseudoexfoliere (PXG), am estimat nivelurile plasmatice de 8-hidroxi-2′-deoxigozganozină (8-OHdG) ca marker pentru leziunile oxidative ale ADN în comparație cu controalele. În plus, am examinat, de asemenea, un efect combinat al statutului polimorfismului lysyl oxidase-like 1 (LOXL1) și al nivelurilor de 8-OHdG asupra riscului de PXG. Materiale și metode. S-a efectuat un studiu retrospectiv de tip caz-control pentru a estima nivelurile plasmatice de 8-OHdG la 41 de pacienți PXG și 45 de controale nonglaucomatoase, utilizând testul imunoenzimatic (ELISA). Testul a fost efectuat în dublu exemplar pe un analizor ELISA automatizat. Două polimorfisme comune (rs1048661 și rs3835942) în gena LOXL1 au fost genotipate prin secvențiere Sanger. Rezultate. Nivelurile medii și mediane de 8-OHdG au fost semnificativ crescute la cazurile de PXG () și la subiecții de sex masculin (). Subiecții cu niveluri mai mari decât cea de-a treia cuartilă (percentila 75 %) au prezentat un risc semnificativ crescut de PXG (odds ratio = 4,06, interval de încredere 95% (IC = 1,11-14,80, )). Comparațiile în cadrul grupului și între grupuri au arătat că nivelurile medii au fost mai mari la indivizii purtători ai variantei de risc LOXL1 (G/G), dar nu au fost semnificative din punct de vedere statistic. În analiza de regresie logistică, atât 8-OHdG (), cât și rs3835942 () au arătat un efect semnificativ din punct de vedere statistic asupra rezultatului PXG. Cu toate acestea, efectul a fost pierdut atunci când au fost incluse vârsta, sexul și rs1048661. S-a observat o corelație pozitivă semnificativă între nivelurile de 8-OHdG și presiunea intraoculară (, ) și raportul cupă/discul (, ). Mai mult, în analiza caracteristicilor de funcționare a receptorului, aria sub curbă a fost semnificativă din punct de vedere statistic () cu o valoare de 0,635 (IC 95% = 0,518-0,751). Concluzii. Studiul demonstrează o asociere a nivelurilor plasmatice crescute de 8-OHdG la pacienții cu PXG, susținând rolul stresului oxidativ și al deteriorării oxidative crescute a ADN-ului în dezvoltarea PXG.

1. Introducere

Glaucomul este una dintre principalele cauze de orbire ireversibilă la nivel mondial , inclusiv în Arabia Saudită . Ca urmare a blocării fluxului de ieșire a umorii apoase la nivelul ochiului trabecular (TM), presiunea intraoculară (PIO) ridicată este considerată ca fiind un factor de risc primar care declanșează moartea celulelor ganglionare retiniene (RGC) și pierderea progresivă a axonilor RGC, cauzând neuropatia optică glaucomatoasă . Glaucomul de pseudoexfoliere (PXG) se caracterizează adesea prin acumularea de materiale fibrilare extraceuloase anormale în segmentul anterior al ochiului, în principal de-a lungul frontierei pupilare, ceea ce este considerat ca fiind un semn distinctiv patologic al bolii . În comparație cu glaucomul primar cu unghi deschis (POAG) mai frecvent, pacienții cu PXG prezintă adesea o evoluție clinică mai agresivă, cu o PIO mai mare, cupaj mai mare, defecte severe ale câmpului vizual și un prognostic mai rău, cu o progresie rapidă a bolii . Există o lipsă de studii epidemiologice sistematice în literatura de specialitate pentru a cunoaște prevalența exactă a PXG în Arabia Saudită. Cu toate acestea, s-a observat că din aproximativ 600 de cazuri noi de glaucom înregistrate la unitatea noastră de glaucom de la Spitalul Universitar Regele Abdulaziz din Riyadh, mai puțin de 10% dintre aceste cazuri sunt diagnosticate cu PXG.

PXG reprezintă o boală complexă și multifactorială cu debut la adult. Boala implică atât factori genetici, cât și factori de mediu care contribuie la fiziopatologia etiologică a bolii . Lysyl oxidase-like 1 (LOXL1) este o genă candidată puternică despre care s-a raportat că contribuie la riscul de dezvoltare a PXG la mai multe grupuri etnice, inclusiv la arabii saudiți. LOXL1 este implicată în formarea și stabilitatea matricei extracelulare . Există linii puternice de dovezi care sugerează un rol al mecanismului (mecanismelor) de stres oxidativ în patogeneza PXG . Stresul oxidativ este, în general, indus prin formarea de specii reactive de oxigen (ROS), cum ar fi superoxidul, peroxidul și radicalii hidroxil, care pot iniția și propaga radicalii liberi . Acumularea nivelurilor de ROS în celule induce leziuni oxidative în macromolecule precum lipidele, proteinele, ARN-ul, ADN-ul și mitocondriile, ceea ce duce la disfuncția celulară și/sau apoptoza acestora . S-a demonstrat că stresul oxidativ determină o creștere a PIO prin inițierea degenerării TM, împiedicând astfel calea de ieșire a apei . Mutațiile, haplogrupurile și scăderea activităților respiratorii în mitocondrii au fost, de asemenea, asociate cu diferite tipuri de glaucom . În plus, un polimorfism în gena glutation S-transferazei (GST), o enzimă implicată în detoxifierea lipidelor peroxidate și a diferitelor toxine dăunătoare, a fost, de asemenea, asociată cu glaucomul . Activitatea redusă a GST poate interfera cu detoxifierea metaboliților oxidativi și agrava efectele dăunătoare ale stresului oxidativ asupra nervului optic . Starea antioxidantă totală (TAS) a probelor biologice este un indicator important al stresului oxidativ și un instrument util pentru a prezice starea oxidativă . Studiul nostru anterior a arătat că nivelurile plasmatice TAS au fost semnificativ scăzute la pacienții cu PXG în comparație cu controalele, susținând rolul stresului oxidativ în patogeneza PXG . În plus, am raportat, de asemenea, un efect combinat al alelelor LOXL1 și al TAS scăzut care poate contribui la riscul general de PXG. La om, experimentele in vivo au demonstrat că deteriorarea oxidativă a ADN-ului este semnificativ mai abundentă în celulele TM ale pacienților cu glaucom. În plus, atât creșterea PIO, cât și afectarea câmpului vizual au fost semnificativ legate de cantitatea de leziuni oxidative ale ADN-ului care afectează celulele TM . Stresul oxidativ/ROS poate induce rupturi sau modificări de baze în ADN, ceea ce duce la eliberarea de produse de oxidare a ADN-ului, inclusiv 8-hidroxi-2′-deoxiguanosină (8-OHdG) . 8-OHdG este unul dintre multiplii produși de oxidare a ADN-ului care poate fi ușor de cuantificat și este utilizat în mod obișnuit ca biomarker pentru a evalua deteriorarea oxidativă a ADN-ului .

Scopul acestui studiu a fost de a investiga deteriorarea ADN-ului indusă de stresul oxidativ sistemic la pacienții cu PXG. Am estimat nivelurile plasmatice de 8-OHdG ca marker pentru deteriorarea oxidativă a ADN-ului și le-am comparat cu controalele sănătoase nonglaucomatoase. În plus, am investigat și efectul combinat al statusului polimorfismului LOXL1 și al nivelului de 8-OHdG asupra riscului de PXG.

2. Materiale și metode

2.1. Populația studiată

Studiul a aderat la principiile Declarației de la Helsinki și a fost aprobat de consiliul de revizuire instituțională și de comitetul de etică a cercetării (număr de aprobare # 08-657). În urma consimțământului în cunoștință de cauză în scris, participanții de origine saudită cu diagnostic clinic stabilit de PXG () și controale sănătoase () potrivite din punct de vedere etnic au fost recrutați pentru studiu la Spitalul Universitar King Abdulaziz din Riyadh, Arabia Saudită. Criteriile de includere-excludere a pacienților și a controalelor au fost descrise anterior .

2.2. Pregătirea plasmei și a ADN-ului

Eșantioanele de plasmă au fost obținute din sânge EDTA în urma centrifugării la 5500 ×g timp de 5 min. ADN-ul a fost extras din stratul buffy cu ajutorul kitului Illustra Blood GenomicPrep Mini Spin Kit (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK). S-a păstrat la -80°C până la utilizare.

2.3. Estimarea nivelurilor plasmatice de 8-hidroxi 2′-dezoxidiguanosină

Stimarea nivelurilor de 8-OHdG a fost realizată cu ajutorul unui kit comercial (Trevigen, Gaithersburg, MD, SUA) bazat pe un test imunoenzimatic competitiv de tip sandwich (ELISA). Testul a fost efectuat în dublu exemplar pe un analizor ELISA automatizat ChemWell-T (Awareness Technology Inc., FL, SUA), în conformitate cu instrucțiunile producătorului. Nivelurile de 8-OHdG au fost stabilite utilizând curba standard și exprimate în ng/mL.

2,4. Secvențierea Sanger a LOXL1

Eșantioanele de ADN au fost secvențiate pentru cele două polimorfisme comune ale genei LOXL1 (rs1048661 și rs3825942) folosind primeri și condiții de amplificare așa cum sunt descrise în altă parte.

2.5. Analiza statistică

Datele sunt prezentate ca medie ± SD și mediană pentru variabilele continue și ca număr și procente pentru variabilele categorice. Testarea normalității pentru nivelurile de 8-OHdG s-a realizat cu ajutorul testului Kolmogorov-Smirnov. Diferențele medii între grupuri au fost testate prin testul t al lui Student. Testul Mann-Whitney U a fost utilizat pentru a compara valorile mediane între pacienți și controale. Variabilele categorice au fost testate prin testul chi-pătrat și testul Fisher’s Exact, acolo unde a fost cazul. Testarea corelațiilor s-a făcut prin metoda Pearson. S-a efectuat o analiză de regresie logistică binară pentru a estima impactul și efectul nivelurilor medii de 8-OHdG și al altor factori de risc asupra rezultatului bolii. A fost generată o curbă a caracteristicilor de funcționare a receptorului (ROC), iar valoarea zonei de sub curbă (AUC) a fost analizată prin testul Mann-Whitney. A fost calculat raportul Odds ratio (OR), iar un interval de încredere (IC) a fost stabilit la 95%. Toate testele statistice au fost bilaterale, iar o valoare mai mică de 0,05 a fost considerată semnificativă din punct de vedere statistic. Analiza statistică a fost efectuată cu SPSS versiunea 19.0 (IBM Corp., Armonk, New York, SUA) și software-ul StatView versiunea 5.0 (SAS Institute, Cary, NC).

3. Rezultate

3.1. Populația studiată și nivelurile de 8-OHdG

După cum se arată în tabelul 1, nu a existat nicio diferență semnificativă între cazurile de PXG și martori în ceea ce privește vârsta, sexul, starea bolii sistemice, fumatul și istoricul familial de glaucom. Testul de normalitate pentru nivelurile de 8-OHdG a arătat o distribuție înclinată (). Atât nivelurile medii, cât și mediane de 8-OHdG au fost semnificativ ridicate la cazurile de PXG și la subiecții de sex masculin în comparație cu martorii (tabelul 1). Figurile 1(a) și 1(b) arată reprezentarea box-plot a nivelurilor de 8-OHdG în funcție de statutul bolii și, respectiv, de distribuția pe sexe.

(a)

(b)

(c)

(d)

.

(a)
(b)
(c)
(d)

Figura 1

Box plot care arată distribuția de 8-nivelurilor de hidroxideoxigozigozină între cazurile și controalele de (a) glaucom de pseudoexfoliere (PXG), (b) bărbați și femei, (c) genotipuri LOXL1 rs1048661 și (d) genotipuri LOXL1 rs3825942. Diferențele au fost testate prin testul Mann-Whitney U atât în cadrul grupurilor de studiu, cât și între acestea. Semnificația a fost observată doar între cazuri și martori și între bărbații martori vs. bărbații PXG, după cum se indică în (a) și, respectiv, (b). Nu a fost observată nicio altă distribuție semnificativă.

3.2. Nivelurile de 8-OHdG și riscul de PXG

Pentru a evalua riscul de PXG asociat cu creșterea nivelurilor de 8-OHdG, concentrațiile de 8-OHdG au fost dicotomizate (necategorizate ca cazuri și controale) la percentila 50 (sau valoarea mediană) și pe cuartile (tabelul 2). Pragul median general al nivelului de 8-OHdG a fost de 17,68 ng/mL. Deși cazurile au prezentat un risc crescut de boală la acest nivel (OR = 1,76, IC 95% = 0,75-4,15), diferența a fost nesemnificativă (). În mod similar, folosind distribuția pe cuartile, au fost identificate două niveluri limită: 10,08 ng/mL (prima cuartilă sau percentila 25) și 27,72 ng/mL (a treia cuartilă sau percentila 75). Utilizând aceste două valori limită, subiecții au fost apoi clasificați în trei grupe: mai puțin decât prima cuartilă, interquartila și mai mare decât a treia cuartilă (tabelul 2). În general, nu a existat un efect aditiv semnificativ al creșterii nivelurilor de 8-OHdG și al rezultatului PXG (χ2 = 4,87, df = 2; ). În plus, în comparație cu nivelurile de 8-OHdG mai mici decât prima cuartilă (<10,08 ng/mL), subiecții cu niveluri interquartile au prezentat un risc crescut nesemnificativ de boală (OR = 2,50, 95% CI = 0,81-7.63, ), în timp ce subiecții cu niveluri mai mari decât a treia cuartilă (percentila 75) au prezentat un risc crescut semnificativ de PXG (OR = 4,06, 95% CI = 1.11-14,80, ).

. 8-OHdG ng/mL Nr. de cazuri (%) Nr. de controale (%) Odds ratio 95% interval de încredere valoarea Pe mediana <17.68 17 (41,4) 25 (55,5) Referință – – ≥17.68 24 (58.5) 20 (44.5) 1.76 0.75-4.15 0.190 Pe cuartile † <10.08 6 (14.6) 15 (33.3) Referință – – 10.08-27.72 22 (53.6) 22 (48.8) 2.50 0.81-7.63 0.103 >27.72 13 (31.7) 8 (17.8) 4.06 1,11-14,80 0,029

Notă. aTestul Chi-pătrat; †prima cuartilă (<percentila 25); interquartilă (percentila 25-75); a treia cuartilă (>percentila 75).

Tabelul 2

Evaluarea riscului de glaucom de pseudoexfoliere în funcție de nivelurile mediane și quartile ale 8-hidroxideoxigozigozinei (8-OHdG).

3.3. Nivelurile de 8-OHdG și polimorfismele LOXL1

Am investigat în continuare efectul genotipic al polimorfismelor rs1048661 (g.5758 G>T) și rs3825942 (g.5758 G>A) în gena LOXL1 asupra nivelurilor de 8-OHdG la cazurile și controalele PXG. În general, așa cum se arată în tabelul 3, nu a existat nicio diferență semnificativă între nivelurile de 8-OHdG și diferitele genotipuri pentru ambele polimorfisme LOXL1 [figurile 1(c) și 1(d)].

Pentru rs1048661, G/G a fost cel mai frecvent genotip, urmat de G/T și T/T. Nu a fost observată nicio homozigozitate T/T în grupul de pacienți, în comparație cu una singură la martori. S-a observat că nivelurile medii de 8-OHdG au fost cele mai ridicate în cazul genotipurilor G/G în comparație cu grupurile G/T, T/T sau G/T + T/T. Cu toate acestea, aceste niveluri nu au variat semnificativ atât în cadrul comparațiilor între grupurile de studiu, cât și între acestea.

În mod similar, pentru rs383592, G/G a fost cel mai răspândit genotip, urmat de genotipurile G/A și A/A, acesta din urmă fiind absent la pacienții cu PXG. G/G a fost cel mai frecvent genotip care a prezentat cele mai ridicate niveluri de 8-OHdG în comparație cu grupurile G/A, A/A sau G/A + A/A. Nivelurile nu au variat semnificativ între cazuri și controale pentru genotipurile G/G (). În plus, o comparație în cadrul grupului la controale nu a arătat, de asemenea, niciun efect semnificativ al genotipului asupra 8-OHdG pentru G/A (), A/A, () și G/A + A/A () în comparație cu genotipul G/G.

3.4. Nivelurile de 8-OHdG și alți factori de risc

În vederea examinării efectului vârstei, sexului, polimorfismelor LOXL1 și a nivelurilor de 8-OHdG la pacienții cu PXG, a fost efectuată o analiză de regresie logistică binară folosind bolnavi/neboliți ca variabilă dependentă (rezultat). Analiza a arătat că atât 8-OHdG (), cât și rs3835942 () au un efect semnificativ din punct de vedere statistic asupra rezultatului bolii. Cu toate acestea, într-o analiză combinată cu vârsta, sexul, 8-OHdG, rs1048661 și rs3835942, niciunul dintre acești factori de risc nu a prezentat un impact semnificativ asupra PXG (tabelul 4).

3.5. Corelația dintre 8-OHdG și alți indici de glaucom la pacienții cu PXG

A fost observată o corelație pozitivă semnificativă între 8-OHdG și PIO (, ) și raportul cupă/discul (, ), spre deosebire de niciuna cu vârsta (, ) și numărul de medicamente antiglaucomatoase (, ).

3.6. Curba ROC și 8-OHdG

Analiza curbei ROC a nivelurilor de 8-OHdG la pacienții cu PXG și la martori a evidențiat o ASC de 0,635 (IC 95% = 0,518-0,751) care a fost semnificativă din punct de vedere statistic (), ceea ce indică faptul că nivelurile plasmatice de 8-OHdG ar putea discrimina în mod satisfăcător între pacienții cu PXG și martori.

4. Discuție

Creșterea ROS, leziunile oxidative și dezechilibrul dintre statusul prooxidant și statusul antioxidant sunt factori critici care contribuie semnificativ la neurodegenerarea glaucomatoasă . Acest studiu raportează niveluri crescute de 8-OHdG sistemic, un marker al deteriorării ADN induse de stresul oxidativ, la pacienții cu PXG.

Deteriorarea ADN-ului poate fi provocată atât de agenți extrinseci, cât și de agenți intrinseci, cum ar fi radiațiile ionizante, lumina ultravioletă, substanțele chimice toxice / ioni metalici și ROS generate ca o consecință a metabolismului celular normal al oxigenului . Procesele endogene care pot contribui în mod plauzibil la o deteriorare continuă a ADN-ului in vivo includ metilarea oxidativă, depurinarea și dezaminarea . Deteriorările induse de ROS includ leziuni ale bazelor și zaharurilor, legături încrucișate între proteine și ADN și rupturi monocatenare/dublu-catenare. Mai mult, baza guanină este cea mai susceptibilă la modificări oxidative din cauza potențialului său redox cel mai mic . Cel mai frecvent produs secundar format ca urmare a modificării oxidative a guaninei de către radicalul hidroxil este 8-hidroxiguanina (8-OH-Gua) și echivalentul său 2′-deoxinucleozidic, 8-OHdG, care este propus a fi un marker excelent pentru deteriorarea oxidativă a ADN-ului . O serie de studii au furnizat dovezi puternice pentru asocierea dintre nivelurile crescute de 8-OHdG și neuropatia optică glaucomatoasă .

Studii inițiale asupra specimenelor TM umane obținute în timpul operației de filtrare au demonstrat prezența unor niveluri ridicate de 8-OHdG la pacienții cu glaucom . Într-un studiu realizat de Sorkhabi et al. care a inclus 15 pacienți cu POAG și 13 pacienți cu PXG, atât umoarea apoasă (AH), cât și nivelurile serice de 8-OHdG au fost ridicate la pacienți în comparație cu controalele . În mod similar, au fost raportate niveluri ridicate de 8-OHdG seric la pacienții cu glaucom primar cu unghi închis în comparație cu subiecții normali . Yuki și Tsubota au raportat un nivel crescut de 8-OHdG/creatinină urinară asociat cu progresia glaucomatoasă a câmpului vizual la subiecții cu glaucom cu tensiune normală . De asemenea, într-un alt studiu recent realizat de Mohanty și colab., atât nivelul de 8-OHdG din plasmă, cât și cel de 8-OHdG din AH au fost semnificativ mai ridicate la pacienții cu POAG în comparație cu martorii cu cataractă . Acest efect a fost atribuit unei expresii reduse a enzimelor de reparare a ADN din calea reparării prin excizie de bază . În plus, studiul a raportat, de asemenea, o corelație pozitivă puternică între nivelurile de 8-OHdG sistemice (plasmatice) și nivelurile de 8-OHdG AH, sugerând că nivelurile de 8-OHdG sistemice ar putea fi predictive pentru nivelurile locale de 8-OHdG din ochi .

Rolul exact al 8-OHdG și/sau al stresului oxidativ care conduce la dezvoltarea și progresia neuropatiei optice glaucomatoase este încă speculativ. 8-OHdG se numără printre cele mai bine caracterizate leziuni oxidative și poate da naștere la mutații de transversiune C : G la A : T . Unele leziuni ale ADN-ului sunt supuse reparării celulare prin mecanisme de reparare a ADN-ului in vivo care scindează ADN-ul deteriorat . Cu toate acestea, eșecul reparării acestor leziuni poate avea implicații biologice grave și poate duce la carcinogeneză sau la dezvoltarea de tulburări neurodegenerative . 8-OHdG poate, de asemenea, să inducă în mod semnificativ scurtarea telomerilor, ceea ce poate contribui la condițiile fiziologice și patologice in vivo . În plus, s-a sugerat că 8-OHdG poate avea un rol de reglementare de tip epigenetic în celulele supuse stresului oxidativ în reglarea transcripției genice . Mai mult, au fost bine documentate efectele anormale ale stresului oxidativ și ale ROS în patogeneza glaucomului prin creșterea PIO și/sau hipoxie, degenerarea TM, deteriorarea celulelor gliale, autofagia, deteriorarea ADNmt, activarea nucleară-kappa B, stresul peroxinitritului și hemodinamica oculară care stimulează apoptoza și căile inflamatorii pentru a promova moartea RGC și deteriorarea nervului optic . Nivelurile crescute de 8-OHdG observate în studiul nostru pot contribui în mod plauzibil la patogeneza PXG prin mecanisme similare.

O asociere puternică a două variante missense, rs1048661 și rs3825942, în gena LOXL1 cu PXG a fost reprodusă în mod constant în mai multe grupuri etnice, inclusiv la arabii saudiți . O înțelegere completă a acestei asocieri genetice cu patologia PXG nu este încă cunoscută; cu toate acestea, au fost postulate o serie de mecanisme. Acestea includ efectul său asupra formării elastinei, alterarea expresiei LOXL1, efectul de splicing sau posibilitatea asocierii/legăturii lor cu o alelă funcțională reală neidentificată . Am investigat efectele genotipice ale acestor două variante comune asupra 8-OHdG și efectul lor combinat asupra riscului de PXG. S-a constatat că genotipurile nu au influențat nivelurile de 8-OHdG, deși nivelurile au fost ridicate în cazul variantelor de risc (G/G). Atât 8-OHdG, cât și rs3835942 s-au dovedit a fi factori de risc semnificativi pentru PXG. Cu toate acestea, această semnificație a fost pierdută într-o analiză combinată care a inclus, de asemenea, vârsta, sexul și genotipurile rs1048861. Lipsa unui număr suficient în fiecare grup de genotipuri ar putea fi o explicație probabilă a acestei pierderi și a absenței oricărui efect semnificativ.

O creștere a PIO și afectarea câmpului vizual au fost corelate în mod semnificativ cu cantitatea de deteriorare oxidativă a ADN-ului în celulele TM . În mod similar, PIO și raportul cupă/disc au prezentat, de asemenea, o corelație pozitivă semnificativă cu nivelurile de 8-OHdG în studiul nostru, ceea ce sugerează o posibilă utilitate a acestuia ca marker al severității bolii. În plus, o serie de rapoarte au susținut existența unei relații inverse între mecanismul (mecanismele) de apărare antioxidantă și stresul oxidativ în fiziopatologia glaucomului . Grupul nostru a raportat anterior, de asemenea, o reducere semnificativă a statusului antioxidant total al plasmei (TAS) la pacienții cu PXG în comparație cu controalele . În mod interesant, nivelurile TAS au fost disponibile pentru pacienții cu PXG (nu și pentru controale; datele nu sunt prezentate) incluși în acest studiu care a arătat o corelație negativă semnificativă între 8-OHdG și TAS la pacienții cu PXG (, ), susținând rolul plauzibil al creșterii stresului oxidativ și al scăderii mecanismelor de apărare antioxidantă în PXG.

Constatările acestui studiu necesită o interpretare prudentă din cauza anumitor limitări ale acestuia. În primul rând, trebuie să recunoaștem faptul că este posibil ca creșterea sistemică a 8-OHdG să nu reflecte exact situația din camera anterioară a ochiului, unde celulele/țesuturile sunt expuse în mod constant la o cantitate mai mare de insulte ale radicalilor liberi și, prin urmare, sunt implicate mai direct în dezvoltarea și progresia glaucomului prin mecanismele de stres oxidativ. Acest lucru ar necesita o validare suplimentară în eșantioane AH. În al doilea rând, studiul este de natură pur descriptivă și nu furnizează nicio dovadă temporală sau mecanicistă și nu sugerează nicio implicație cauzală a nivelului ridicat de 8-OHdG în PXG. În cele din urmă, în acest studiu a fost examinat un număr relativ mic de eșantioane. O replicare într-o cohortă mult mai mare ar consolida cu siguranță observațiile acestui studiu. Cu toate acestea, având în vedere o diferență medie (mărimea efectului) de 13 ng/mL în concentrația de 8-OHdG, așa cum a fost observată între cazurile de PXG și martorii, cu o deviație standard medie de 20 și o eroare de tip I de 0,05 (bilaterală), studiul prezintă o putere de >80%.

5. Concluzie

În concluzie, studiul demonstrează un nivel crescut de 8-OHdG sistemic la pacienții cu PXG, susținând o asociere a acestui marker cu PXG și rolul plauzibil al stresului oxidativ și al deteriorării oxidative crescute a ADN-ului în etiologia PXG.

Date disponibile

Datele care susțin concluziile acestui articol sunt toate prezentate în cadrul articolului.

Aprobare etică

Studiul a aderat la principiile Declarației de la Helsinki și a primit aprobarea Comitetului de evaluare instituțională și a Comitetului de etică a cercetării de la Colegiul de Medicină, Universitatea King Saud, Riyadh, Arabia Saudită.

Consimțământ

Consimțământul informat scris a fost obținut de la toți participanții înainte de includerea lor în acest studiu.

Conflicte de interese

Autorii nu raportează conflicte de interese. Finanțatorul nu a avut niciun rol în proiectarea studiului, în colectarea, analiza și interpretarea datelor și în redactarea manuscrisului. Autorii sunt singurii responsabili pentru conținutul și redactarea lucrării.

Recunoștințe

Autorii doresc să mulțumească Vice-Decanatului Catedrei de Cercetare Științifică și Catedrei de Cercetare a Gluacomului în Oftalmologie de la Universitatea King Saud, prin intermediul cărora a fost susținută această lucrare.

.