5-Metoxi-α-metyltryptamin (5-MeO-AMT) är ett tryptaminderivat som används rekreativt på grund av dess rapporterade hallucinogena och stämningshöjande effekter. Studier tyder på att de psykofarmakologiska effekterna av tryptaminer involverar aktivering av serotoninreceptor 2a (5-HTR2a) i hjärnan. Head-twitch response (HTR) används ofta som ett beteendekorrelat för att bedöma 5-HTR2a agonistisk aktivitet hos ett läkemedel. Vi undersökte därför om 5-MeO-AMT inducerar HTR hos möss och utforskade dess verkningsmekanism. 5-MeO-AMT (0,3, 1, 3, 10 mg/kg) administrerades en gång om dagen i 7 dagar, och HTR mättes efter 1 dag (akut) och 7 dagar (upprepad) administrering. En annan kohort av möss behandlades med 5-HTR2a antagonisten ketanserin (KS) före administrering av 5-MeO-AMT. Vi mätte 5-HTR2a och 5-HTR2c mRNA-nivåer i prefrontal cortex hos möss som behandlades akut eller upprepade gånger med 5-MeO-AMT. Vi utförde western blotting för att bestämma läkemedlets effekter på uttrycket av G-protein (Gq/11), proteinkinas C gamma (PKC-γ) och extracellulära signalreglerade kinaser 1/2 (ERK1/2), förutom PKC-γ- och ERK1/2-fosforylering. Dessutom utvärderade vi potentiella belönande och förstärkande effekter av 5-MeO-AMT med hjälp av paradigm för lokomotorisk sensitisering, betingad platspreferens (CPP) och självadministration (SA). Akut administrering av 5-MeO-AMT framkallade HTR, medan upprepad administrering resulterade i tolerans. KS blockerade den 5-MeO-AMT-inducerade HTR. 5-MeO-AMT ökade 5-HTR2a mRNA-nivåerna och inducerade PKC-γ-fosforylering i prefrontal cortex. 5-MeO-AMT inducerade inte lokomotorisk sensibilisering, CPP eller SA. Denna studie visar att 5-MeO-AMT inducerar HTR genom 5-HTR2a aktivering i den prefrontala cortexen och kan ha låg potential för missbruk.