ABSTRACT
Medlemmar av ABC-F-underfamiljen av ATP-bindande kassettproteiner förmedlar resistens mot ett brett spektrum av kliniskt viktiga antibiotikaklasser som är riktade mot ribosomen hos Gram-positiva patogener. Mekanismen genom vilken dessa proteiner verkar har länge varit föremål för kontroverser, med två konkurrerande hypoteser som var och en har fått stort stöd: antibiotikautflöde kontra ribosomalt skydd. Här rapporterar vi om studier som använder en kombination av bakteriologiska och biokemiska tekniker för att avslöja resistensmekanismen för dessa proteiner, och ger flera bevis som tillsammans ger tydligt stöd för hypotesen om ribosomalt skydd. Särskilt anmärkningsvärt är att vi visar att tillsats av renade ABC-F-proteiner till en in vitro-translationsanalys föranleder en dosberoende räddning av translationen, och visar att sådana proteiner kan förflytta antibiotika från ribosomen in vitro. Såvitt vi vet utgör dessa experiment det första direkta beviset för att ABC-F-proteiner förmedlar antibiotikaresistens genom ribosomalt skydd.
IMPORTANS Antimikrobiell resistens hör till de största hoten för närvarande mot människors hälsa. Att klarlägga de mekanismer genom vilka mikroorganismer motstår effekten av antibiotika är centralt för att förstå biologin bakom detta fenomen och har potential att informera om utvecklingen av nya läkemedel som kan blockera eller kringgå resistens. Medlemmar av ABC-F-familjen, som omfattar lsa(A), msr(A), optr(A) och vga(A), ger tillsammans resistens mot ett bredare spektrum av kliniskt betydelsefulla antibiotikaklasser än någon annan familj av resistensdeterminanter, även om deras verkningsmekanism har varit kontroversiell sedan de upptäcktes för 25 år sedan. Här presenterar vi de första direkta bevisen för att proteiner i ABC-F-familjen verkar för att skydda den bakteriella ribosomen från antibiotika-medierad hämning.