2nd INTERNATIONAL CONFERENCE ON APPLIED MICROBIOLOGY AND BENEFICIAL MICROBES
OCTOBER 23-25, 2017 OSAKA, JAPAN
Yongjun Lee, Seungchan Cho, Dongjun Kim, Eui-Joon Ki, Kangsan Roh, Sang-Ho Cho, Sungrae Cho, Hee-Seong Byun, Haneul Seo, He Jiang, Hocheol Shin och Sukchan Lee
Sungkyunkwan University, Republic of Korea
Posters & Accepted Abstracts: Appli Micro
Sammanfattning :
3D8 single chain variable fragment (scFv) är en rekombinant antikropp. 3D8 scFv består av variabla tunga kedjedomäner (VH) och variabla lätta kedjedomäner (VL) som är sammanlänkade med en flexibel peptidlänkare. 3D8 scFv isolerades från autoimmunbenägen MRL-lpr/lpr-mus. Den har DNase- och RNase-aktiviteter utan betydande sekvensspecificitet. Den internaliseras genom caveola-medierad endocytos och ackumuleras i cytosolen. I tidigare studier har WT 3D8 scFv visat antivirala effekter mot pseudorabiesvirus (PRV) och herpes simplexvirus typ-1 (HSV-1). Liksom WT 3D8 scFv kan 3D8 VL hydrolysa DNA- och RNA-substrat och den tränger också in i cytoplasman. I den här studien har jag jämfört den hydrolyserande DNA- och RNA-aktiviteten mellan 3D8 VL och WT 3D8 scFv. Jag har mätt stabiliteten hos 3D8 VL i olika pH-områden och temperaturer med hjälp av FRET-analys (Fluorescence Resonance Energy Transfer). Jag bekräftade också cellpenetrationsaktiviteten i cytoplasma genom cellmembranet och visade att 3D8 VL inte har någon cytotoxisk effekt mot värdcellen som visades av WT 3D8 scFv (in vitro). 3D8 VL-protein påvisades i flera organ (lever, lunga och hjärna) och blod när jag injicerade proteinet i musen genom intraperitoneal injektion. Med hjälp av in vivo avbildning har jag bekräftat att 3D8 scFv och VL kan absorberas i blodet och sedan cirkulera i hela kroppen och slutligen nå flera organ. Resultaten visar att 3D8 VL har liknande biokemiska och biologiska egenskaper som WT 3D8 scFv. Sammantaget kan 3D8 VL ersätta WT 3D8 scFv för ett potent antiviralt protein.
Biografi :
Yongjun Lee har fått sin masterexamen från Sungkyunkwan University. Hans forskning handlar om antivirala proteiner (3D8 scFv-protein) med hjälp av E. coli-expressionssystem och proteinernas transport genom blod-hjärnbarriärerna.