Poliovirus (PV)-infekterade celler genomgår en omfattande proliferation och omläggning av intracellulära släta membran för att generera vesiklar på vilka viral RNA-replikation sker. PV-proteinerna 2C och 2BC är kända för att vara tätt associerade med dessa membranösa replikationskomplex och har föreslagits vara involverade i bildandet av dessa virusinducerade vesiklar. Vi har uttryckt dessa proteiner, och proteiner med mutationer i de förmodade nukleotidbindningsmotiven (NTP), i mänskliga celler med hjälp av rekombinanta vacciniavirus och T7 RNA-polymerasstyrd transkription. För att fastställa de subcellulära lokaliseringsegenskaperna hos dessa proteiner i avsaknad av andra PV-proteiner och för att avgöra om de inducerade ultrastrukturella förändringar undersöktes celler som uttryckte 2C- och 2BC-proteiner med hjälp av immunofluorescens (IF)-mikroskopi (IF), elektronmikroskopi (EM) och immuno-EM (IEM). Cytoplasman i celler som uttrycker antingen 2C eller 2BC uppvisade vesiklar med en diameter på 50-350 nm, som liknade dem som fanns i PV-infekterade celler. Både 2C och 2BC var associerade med dessa vesiklar. Mutationer i det förmodade NTP-bindningsmotivet påverkade inte vesikelinduktionen av 2C eller 2BC. Trots den membranreorganisering och vesikelbildning som inducerades av 2C- och 2BC-proteinerna observerades ingen ökad syntes av lipid. Guanidinhydroklorid i en koncentration som hämmar PV-replikation hade inga signifikanta effekter på IF-mönstren för vare sig 2C eller 2BC. En ytterligare framträdande förändring i celler som uttrycker 2C, men inte 2BC, var bildandet av omfattande tubulära membranstrukturer med ett myelinliknande arrangemang i lumen av det grova endoplasmatiska retikulumet. IEM-analyser visade att 2C var associerad med dessa strukturer. I närvaro av andra PV-proteiner upptäcktes inte de tubulära membranstrukturer som inducerades av 2C. Dessa strukturer observeras inte i poliovirusinfekterade celler, men indikerar sannolikt en ny egenskap hos 2C som inducerar en komplex interaktion med intracellulära membran.