Hoppa till innehåll
Meny
CDhistory
CDhistory

Tillämpning av alkalisk sackarosgradientcentrifugering vid analys av DNA-replikation efter DNA-skador

Publicerat den december 19, 2021 av admin

Sammanfattning

Utrocentrifugering med densitetsgradient av sackaros är en kraftfull teknik för fraktionering av makromolekyler som DNA, RNA och proteiner. För detta ändamål läggs ett prov som innehåller en blandning av makromolekyler av olika storlek i lager på ytan av en gradient vars densitet ökar linjärt från toppen till botten. Under centrifugering sedimenterar makromolekyler av olika storlek genom gradienten med olika hastighet. Sedimentationshastigheten beror förutom på centrifugalkraften även på makromolekylernas storlek, form och densitet samt på gradientens densitet och viskositet. På detta sätt separeras makromolekylerna efter storlek, där större makromolekyler sedimenterar mot botten och lättare makromolekyler stannar kvar nära gradientens topp. Metoden har varit särskilt framgångsrik när det gäller storleksfraktionering av stora DNA-molekyler och har använts flitigt för att mäta induktion och reparation av DNA-brott efter exponering för klastogena faktorer. Här beskriver vi en anpassning av denna metod som kan användas för analys av nysyntetiserat DNA som bildas under DNA-replikation. Genom storleksanalys av nyskapat DNA i alkaliska sackarosgradienter kan variationer i replikationsaktiviteten mätas efter exponering av celler för DNA-skadande ämnen. Metoden är särskilt användbar eftersom den gör det möjligt att skilja mellan DNA-skador-medierade effekter på kedjeförlängning respektive replikoninitiering, vilket är viktigt för en djupgående analys av kontrollpunkten inom S-fasen. Denna förmåga gör tekniken unik och motiverar dess något arbetskrävande karaktär.

Lämna ett svar Avbryt svar

Din e-postadress kommer inte publiceras. Obligatoriska fält är märkta *

Senaste inläggen

  • Acela är tillbaka:
  • OMIM Entry – # 608363 – KROMOSOM 22q11.2 DUPLIKATIONSSYNDROM
  • Kate Albrechts föräldrar – Lär dig mer om hennes far Chris Albrecht och hennes mor Annie Albrecht
  • Temple Fork Outfitters
  • Burr (roman)

Arkiv

  • februari 2022
  • januari 2022
  • december 2021
  • november 2021
  • oktober 2021
  • september 2021
  • augusti 2021
  • juli 2021
  • juni 2021
  • maj 2021
  • april 2021
  • DeutschDeutsch
  • NederlandsNederlands
  • SvenskaSvenska
  • DanskDansk
  • EspañolEspañol
  • FrançaisFrançais
  • PortuguêsPortuguês
  • ItalianoItaliano
  • RomânăRomână
  • PolskiPolski
  • ČeštinaČeština
  • MagyarMagyar
  • SuomiSuomi
  • 日本語日本語
©2022 CDhistory | Drivs med WordPress och Superb Themes